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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
427
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃
- 规格:
5ml|10ml
特别提示:包括增强型抗荧光淬灭封片剂在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:增强型抗荧光淬灭封片剂
产品货号:GL1077
产品规格:5ml|10ml
用途:
又称抗荧光衰减封片剂,是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂。封片后可以-20度或4度保存,保存几周后荧光强度才有所减弱,罗丹明荧光素再聚*烯醇中溶解,因此不能用此封片剂。
注意事项:
可以有效延长组织切片的观察和保存时间。
储存条件:4℃,避光,12个月
除了增强型抗荧光淬灭封片剂,,我公司还供应以下相关产品:
名称:抗His标签抗体琼脂糖介质
货号:WE0330
规格:100μl|500μl
抗His标签免疫亲和介质是将抗His标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上,这种琼脂糖能进行免疫沉淀或者免疫共沉淀,能检测包含有His标签的蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽序列
应用范围:IP
名称:BSA TBS缓冲系统封闭液
货号:ZN1908
规格:500ml
产品保存:4℃保存,一个月有效
产品特点:
1.相容性好,可用于其它的免疫检测封闭。
2.快速。
3.高信噪比,背景更干净。
名称:增强型蛋白印迹膜再生液
货号:ZN1922
规格:100ml
产品保存:4℃保存,一年有效
产品说明:增强型蛋白印迹膜再生液能够安全高效地从硝酸纤维素膜和 PVDF 膜上去除一抗和二抗,且不会破坏抗原,从而再次检测化学发光的免疫印迹。与重新跑一个SDS-PAGE 胶比较,不仅省时省力,而且可以消除重新上样而带来的误差,使可比性更强。
产品特点:
1.不需重新制胶电泳
2.节省珍贵样品,在同一张膜上使用相同的样品重新检测
3.高效,去除效果远优于自制缓冲液
4.温和配方,在抗体剥离及重新检测时不会对靶蛋白造成伤害
5.不含硫醇,无刺鼻气味
产品应用:
1.可重复使用硝酸纤维素膜或PVDF 膜,通过不同的一抗检测不同的标靶
2.可重新检测印迹,改正或优化初次实验中无效的抗体浓度
注意事项:
1.刚从冷冻保存中拿出来会出现 SDS的沉淀,建议温水溶解再使用。
2.建议先检测表达量较低的目的蛋白,用再生液处理后检测表达量高的蛋白。
3.本品适用于 NC 膜和 PVDF 膜,推荐使用 PVDF 膜,效果更佳。
4.本产品适用于 HRP 标记的二抗,且用化学发光法检测的印迹膜。
需要材料:
1.化学发光底物
2.用含 0.05%Tween-20的TBS或PBS
3.用于第一次和第二次蛋白质印迹实验的一抗和二抗
4.胶片,化学发光成像仪
使用方法:
注:膜可以 4℃保存在 PBS或TBS 中,直到可以进行剥离程序。
1.将再生液用温水溶解或室温平衡至溶解。
2.用 TBS-T或PBS-T 将膜洗10分钟×3次。
3.将印迹膜放入再生液中,室温孵育20-30分钟。使用足够的体积以确保印迹膜完全润湿(对于8×10cm 印迹需要约 20mL)。
注意:优化孵化时间和温度对于获得zuì佳结果是必不可少的。对于一些抗体,室温孵育就足够了。
然而,高亲和力抗体可能需要再温育5至10分钟。
4.用 TBS-T或PBS-T将膜洗10分钟×3次。
5.按如下方法检测:
A.完整去除二抗的测试:将膜进行发光检测,如果 5分钟内未检测到信号,则二抗已经成功地从抗原或一抗中去除。
B.完整去除一抗的测试:用 HRP 标记的二抗孵育膜,然后用洗涤缓冲液洗涤。孵育新的一抗和二抗,进行发光检测,如果 5分钟内没有检测到信号,则已经成功地将一抗从抗原中除去。
6.如果在步骤 5 中检测到信号,则返回步骤 2,再剥离 5-15分钟。一些抗原/抗体系统需要更高的温度或更长的孵育时间来完全去除它们。优化剥离时间和温度以确保完全去除抗体,同时防止对抗原的损伤。
7.确定膜被适当剥离后,可以进行第二次免疫印迹实验。
注意:1.印迹可以剥离和重复检测多次,但可能需要更长的曝光时间或更灵敏的化学发光底物。
如果抗原在再生液中变得不稳定,随后的反应可能导致信号降低。
2.剥离后建议重新封闭印记膜。
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文献和实验immyself 有那种干了之后会把盖玻片牢牢粘著的吗? 现在用的封片剂是液态的,老是滑来滑去 谢谢! hongfunv1984 我最近也在做细胞免疫荧光,也是发现这个问题。后来发现是防淬灭剂加的太多了,现在在做实验室就没有这种情况了。。你可以稍加一点就行了。用10*10的盖玻片封片。 photomedicine 是的,防淬灭剂不能加太多,否则会滑来滑去,加1-2滴其实就够
剂。如卤素离子、重金属离子、具有氧化性的有机化合物(硝基化合物、重氮化合物、羰基化合物和羟基化合物)及氧分子等。 2)荧光的抗淬灭:标记样品的荧光淬灭是在荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察时遇到的主要问题。由于激光扫描共聚焦显微镜具有更强的功率和聚焦更准确的光束,与普通荧光显微镜相比,标本的光漂白作用更为明显,荧光素的荧光可在连续观察过程中逐渐减弱或消失。因此,应考虑使用抗荧光淬灭剂(抗荧光衰减剂)。常用抗荧光淬灭剂有P-苯二胺(Para-phenylene diamine,PPD)、n-丙基
。 7. 光漂白 减少照明强度/时间。 选用抗荧光淬灭封片剂。 二、背景太高了怎么办? 大家在操作时可以通过设置对照,帮助我们迅速判断背景的来源。对照包括自发荧光对照(无一抗、二抗)和无一抗对照。 1. 封闭不足 选用二抗种属来源的血清封闭。 选用链霉亲和素/生物素系统,需要用链霉亲和素封闭内源的生物链酶。 选用HRP系统,需要使用过氧化氢等商业化试剂盒去活化内源性HRP。 选用AP系统,需要使用左旋咪唑等商业化试剂去活化内源
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