中量/大量组织/细胞基因组DNA提取试剂盒

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北京百奥莱博专业生产供应中量/大量组织/细胞基因组DNA提取试剂盒，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

中量/大量组织/细胞基因组DNA提取试剂盒
规格：20次/50次
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：YBP019

想要了解更多关于中量/大量组织/细胞基因组DNA提取试剂盒的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品：

·双荧光素酶报告基因检测试剂盒
编号：YBP165
规格：100次/500次
储存：未打开包装前避光储存于-20℃，打开包装后根据产品说明书上的单个组分的储存条件保存。避免反复冻融。
产品介绍：
采用生物发光（bioluminescent）法对报告基因进行检测是最常用的有效手段。荧光素酶（luciferase）能催化底物荧光素（luciferin）的转化，发射出光子。萤火虫荧光素酶（Firefly luciferase）和海肾荧光素酶（Ranilla luciferase）催化的发光反应，具有相似的光学特征和很好的浓度线性范围（7~8个数量级的线性范围），酶的检测灵敏度达10-14~10-20 mol，但两者催化的化学反应底物和最适反应条件完全不同。利用这一特性，将这两种荧光素酶配合，即可形成十分有效的双荧光素酶报告基因系统，其中Ranilla luciferase通常作为内参照。
双荧光素酶报告基因检测试剂盒可在单个样品中依次检测萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶，为双荧光素酶报告基因的检测提供了有效的手段。试剂盒中的Cell Lysis Buffer适合于两种荧光素酶活性的保持，且兼容于其他类型的报告基因和蛋白定量检测试剂。优化的酶反应体系，使每种酶的荧光半衰期超过15min，以便同时操作多个样品，并保证萤火虫荧光素酶的发光及时淬灭，也不影响随后的海肾荧光素酶的检测。
适用范围：
适用于萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶共转染哺乳动物细胞的双荧光素酶报告基因检测。
产品特点：
1．简单：试剂易于配制、保存，样品检测操作简单。
2．快速：5-10分钟内完成样品裂解，几秒内完成双荧光素酶检测。
3．灵敏度高：两种荧光素酶的检测灵敏度达10-14~10-20 mol。
4．稳定：萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶发光值稳定可靠。
5．准确性高：使用海肾荧光素酶作为内对照可以减少细胞数量、生长状态、转染效率及非特异性细胞反应等因素的影响，得到更精确的结果。
操作步骤：
1. 试剂准备：
（1）稀释Cell Lysis Buffer（CLB）：用无菌水将5×Cell Lysis Buffer 进行5倍稀释，配制成1倍的CLB使用。CLB -20℃保存，使用前需新鲜配制。
（2） 配制Luciferase Assay Reagent：将Luciferase Dilution Buffer和50×Luciferase Assay Reagent室温融化，用Luciferase Dilution Buffer将50Luciferase Assay Reagent进行50倍稀释，稀释好的Luciferase Assay Reagent分装后20℃保存，避免反复冻融。测定前取出室温融化使用。
（3）配制Stop Reagent：将Stop Buffer室温融化后，按照每个样品100ul的体系，根据样品数量50倍稀释Stop Reagent 50×。Stop Reagent需使用前新鲜配制，不可长期保存或反复冻融。stop buffer融化之后，会有白色沉淀出现，将其平衡至室温后充分混匀，白色沉淀会消失。
2. 细胞裂解：
（1）洗涤细胞：吸除细胞培养基，用足量的PBS轻轻洗涤细胞两次，尽量去除洗涤液。
（2）加入配制好的细胞裂解液CLB：按照如下的用量加入CLB，用移液器轻轻吹打几次，促进细胞充分裂解，室温放置5-10分钟后用来检测，如果直接将细胞培养板放置在振荡器上比较温和的裂解，可适当延长裂解时间至20分钟。
（3）样品裂解后如果不立即进行检测，应-20℃保存，长期保存需-80℃。
3. 萤火虫荧光素酶活性测定：
取100ul Luciferase Assay Reagent加入测定管底部，加入20ul待测样品，轻轻混匀后，放入仪器进行检测。也可以取50ul Luciferase Assay Reagent加入10ul待测样品进行检测，但每个样品的检测体系需要一致。
4. 海肾荧光素酶活性测定：
取100ul 稀释好的Stop Reagent加入步骤3的测定管中，轻轻混匀后，放入仪器进行检测。Stop Reagent能够立即终止萤火虫荧光素酶发光，并且同时启动海肾荧光素酶发光反应。如果步骤3中采用50ul检测试剂加入10ul待测样品的体系，则Stop Reagent加入50ul。


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·口腔拭子基因组DNA快速提取试剂盒
编号：YBP037
规格：50次/100次/200次
产品介绍：
独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞并灭活细胞内核酸酶， 然后基因组DNA选择性吸附于玻璃纤维膜， 再通过一系列快速的漂洗-分离的步骤， 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除， 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从膜上洗脱。
产品特点：
• 不使用有毒的苯酚等试剂， 也不需要乙醇沉淀等步骤， 而且省去了离心步骤。
• 快速简捷， 单个口腔拭子样品操作一般可在90分钟内完成。
• 多次过柱漂洗可确保高纯度， 提取出的基因组DNA OD260/OD280典型的比值达1.7-1.9，长度可达20kb -50kb， 可直接用于PCR、outhern-blot和各种酶切反应。
• 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5，pH过低影响洗脱效率。用水洗脱所得的DNA应该保存在-20°C。DNA如果需要长期保存， 可以用TE缓冲液洗脱(10 mM Tris-HCl， 1mM EDTA， pH 8.0)，但是EDTA可能影响下游酶切反应， 使用时可以适当稀释。
适用范围：适用于从口腔拭子中快速提取基因组DNA。
产品储存：
• 结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀， 可在37°C水浴几分钟帮助重新溶解， 恢复澄清透明后冷却至室温即可使用。
• 为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状。收到后可短暂离心， 加入1 ml 灭菌ddH2O溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性， 因此溶解后立即按照每次使用量(10/20 μl)分装， -20°C保存。
• 避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、 氧化、 pH值变化， 各溶液使用后应及时旋紧盖子。


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·EASYspin酵母RNA快速提取试剂盒
编号：YBP003
规格：50次
适用范围：
适用于从酵母中快速提取无基因组DNA污染的高纯度的酵母RNA。
本试剂盒按照指示储存12个月不影响使用效果。
储存事项：
1.所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
2.不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
3.为避免降低活性，方便运输，提供Lyticase(2500U)为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入0.25ml灭菌水溶解配制成10U/μl，因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量分装冻存，－20℃保存，避免反复冻融。
4.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍：
酵母细胞经lyticase处理去除细胞壁后，独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后，RNA选择性吸附于离心柱内玻璃纤维膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的RNase free H20将纯净RNA从玻璃纤维膜上洗脱。
产品特点：
1.离心吸附柱内玻璃纤维膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.基因组DNA清除柱可以有效的消除基因组DNA的污染。
5.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。
注意事项
1.第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
2.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到12，000 rpm的传统台式离心机。
3.需要自备乙醇，β-巯基乙醇，水浴锅。
4.裂解液RLTplus2 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5.RNA 纯度及浓度检测:
完整性：RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳 (电泳条件：胶浓度1.2%；0.5×TBE电泳缓冲液；150v，15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA，电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5 kb 和2kb，分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA亮度的1.5-2.0 倍，否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯 度：OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA，OD260/OD280 读数（10mMTris, pH7.5）在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品，假定在10mM Tris，pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间，在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9 之间，但这并不表示RNA 不纯。
浓 度：取一定量的 RNA 提取物，用RNase-free 水稀释n 倍，用RNase-free水将分光光度计调零，取稀释液进行OD260, OD280 测定，按照以下公式进行RNA浓度的计算：终浓度（ng/μl）= (OD260)×(稀释倍数n)×40
6.如果破壁效果不好导致RNA产量低，可以加大lyicase用量来提高酶工作浓度，还可以延长消化时间来提高效果，不适合Lyticase消化的酵母可选用Zymolase或者其它方法如玻璃珠涡旋，反复冻融等。
操作步骤：（实验前请先阅读注意事项）
提示：
第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量无水乙醇!
操作前在裂解液RLTplus2中加入β-巯基乙醇至终浓度1%，如1 ml RLTplus2 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLTplus2 4℃可放置一个月。
吸取使用量的缓冲液SE加入0.1%β-巯基乙醇，回复到室温备用。
1.小量酵母培养细胞
a.收集1ml （约107细胞）处于对数生长期酵母培养物到1.5ml离心管， 9,000 rpm离心30秒，尽可能吸弃上清。
b.加入100μl缓冲液SE（使用前先吸取使用量放入1.5ml离心管，回复到室温备用）中，轻柔吹打充分重悬细胞；根据酵母量加入约50U lyticase，充分颠倒混匀，37℃温育10－30分钟消化细胞壁，中间可颠倒数次帮助消化。
c.加入350μl裂解液RLTplus2（确认已经加入β-巯基乙醇至终浓度1%），剧烈涡旋吹打，充分裂解混匀。（如果有明显不溶物，最高速离心2分钟，取全部上清）
d.将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中（清除柱放入收集管中），12,000rpm离心30~60秒，收集滤液。在滤液中加入250μl 96－100％乙醇，立即吹打混匀，不要离心。
e.接操作步骤项下3。
2.中量酵母培养细胞
a.收集2－3ml （约3x107细胞）处于对数生长期酵母培养物到1.5ml离心管（超过1.5ml可分两次在同一个离心管内进行收集细胞），12,000rpm离心15秒，尽可能吸弃上清。
b.加入600μl缓冲液SE（使用前先吸取使用量放入1.5ml离心管，回复到室温备用）中，轻柔吹打充分重悬细胞；根据酵母量加入约100-150U lyticase，充分颠倒混匀，37℃温育10－30分钟消化细胞壁，中间可颠倒数次帮助消化。
c.12,000 rpm离心1分钟，尽可能吸弃上清。
d.加入350μl裂解液RLTplus2（确认已经加入β-巯基乙醇至终浓度1%），剧烈涡旋吹打，充分裂解混匀。（如果有明显不溶解物，最高速离心2分钟，取上清）
e.将所有裂解物上清转移至一个基因组DNA清除柱中（清除柱放入收集管中），12,000rpm离心30~60秒，收集滤液。在滤液中加入等体积70％乙醇（DEPC水配制，约350μl）立即吹打混匀，不要离心。
f.接操作步骤项下3。
3.将混合物加入一个吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）12,000 rpm离心30-60秒，弃掉废液。
4.加700μl 去蛋白液RW1，室温放置30秒，12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。
如果DNA残留明显,可在加入RW1后室温放置5分钟再离心。
5.加入700μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。加入500μl漂洗液RW，重复一遍。
6.将吸附柱RA放回空收集管中，12,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
7.取出吸附柱RA，放入一个RNase free离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water（事先在 70-80℃水浴中加热）， 室温放置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。
8.如果预期RNA产量>30μg,加30-50μl RNase free water重复步骤7, 合并两次洗脱液,或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA浓度高)。
洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。

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