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100万
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觅拓生物
- 细胞形态:
上皮样
- 生长状态:
贴壁生长
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T25
培养条件:MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS;1%NEAA
传代方法:1:4~1:6传代;每周2次。
冻存条件:基础培养基+5%DMSO+20%FBS
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文献和实验大多数朋友说推荐培养液为DMEM加10%胎牛血清,1%谷氨酰胺,我们这里用1640加10%新生牛血清,效果也不错。DMEM不容易观察,有时候等DMEM黄了的时候,细胞已经严重缺乏养料,1640颜色变化比较明显,也比较符合细胞当时的情况。细胞置于5%CO2、37度培养,细胞生长较快,根据你留在瓶里细胞的数量,50%两天后传代一次。0.25%胰酶+0.01%EDTA消化,该细胞容易抱团,我是一般先用胰酶洗一下,然后加胰酶37度,观察细胞形态变化,细胞变圆时,倒掉胰酶,加入培养液,吹打重悬
panzerking 我在设计实验 想用NF-kB-luc做报告基因 是不是一定要用β-galactosidase 报告质粒或者Renilla荧光素酶报告质粒作为内参? 我看了有些文献 好像有的用 有的一个都没用 是有这样的情况吗 或者是不是只要保证control组NF-kB-luc转染条件一样就可以做为可用的数据了? lwjssry 不可以,一定要用内参,需要校正对照和处理组细胞数目的差异
相关专题 总有一种转染方法适合你 geniusma问: 准备做hepg2的转染试验了,实验室常用的的是lipofectamine 2000,听说hepG2的转染效率很低,并且这种细胞比较容易成团,这会影响转染效率吗?是否用trypsin+EDTA 可以使其成为单个细胞不成团?哪种转染方法更适合hepg2?需要改用电转吗?如果用lipofectamine 2000,加入的比例如何?请有经验的朋友告知详细情况,谢谢
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