LB4404农杆菌感受态细胞

LB4404 农杆菌感受态细胞
目录号：EC0012
保存条件：-80℃，干冰运输


产品规格
LB4404 10×100μl



产品说明
LB4404农杆菌感受态细胞是经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的热击转化，具有利福平抗性，适用于水稻、烟草,,拟南芥等植物的转基因操作，经pCAMBIA1302质粒检测转化效率高达10³ cfu/μg（详见图）。


操作方法
1. 取-80℃保存的农杆菌感受态于冰上或室温融化。
2. 每100μl感受态加1ug质粒DNA混匀，依次于冰上静置10分钟、液氮5分钟、37℃ 5分钟、冰浴5分钟。
3. 加入700μl无抗生素的YEP或LB液体培养基，于28℃振荡培养2~3小时。
4. 5000rpm离心一分钟收集菌体，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的YEP或LB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天。
5． 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的YEP或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于28℃直至液体被吸收，倒置培养，28℃培养2-3天。


注意事项
1.感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2.转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3.感受态细胞最好在冰上融化。
4. 混入质粒时应轻柔操作。
5. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。