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深圳子科生物
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美国Qiagen官网:http://www.qiagen.com/
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货号9020979,美国Qiagen,Multi.Carrier (2) for 12 cult.tubes 15ml
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文献和实验).Transfer serum/white blood cells to 50 ml tube, underlay 12 ml RT Histopaque 1077.Spin 2500 rpm/30min at RT. To take mononuclear cells:Take off serum above band. (See attached figure, in preparation)Take mononuclear band + some Ficoll into two 15ml tubes
Aspirate medium from a 6-well plate and wash with PBS Ca++/Mg++ free. Incubate for 30 min in 1.5 mg/ml Collagenase IV in DMEM:F12 at 37°C. Using a cell scraper, remove the colonies and transfer to a 15ml tube. Rinse
Purification of human mononuclear cells and neutrophils
To take mononuclear cells: Take off serum above band. (See attached figure, in preparation) Take mononuclear band + some Ficoll into two 15ml tubes. Add cold media A up to 15ml. Spin at 1800 rpm 4o C for 5min. Pool pellet into one 15ml
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