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文献和实验1ml RIPA buffer contains 35μl proteinase inhibitor(sigma cat no P8340) and 10μl phosphatase inhibitorRIPA buffer 最终浓度1M Tris-HCl pH7.5) 5 ml 50mMNaCl 0.87g 0.15 MNa-deoxycholale 0.1g (1%)0.5M EDTA(pH8.0) 0.8mlNaF 41 mgNonidet P40 1 ml (1%)Aprotinin
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这篇综述重点说明使用 RIPA 裂解液提取总蛋白以及下游实验中可能存在的问题。RIPA 裂解液常用于从脊椎动物细胞和组织中提取总蛋白 [1]。但是由于蛋白质间有较大的差异和非蛋白成份的干扰,所以从一个样本中同时释放和溶解所有蛋白质是非常困难的。特别是一些整合到膜上的蛋白质,或与其他蛋白质 / 核酸形成复合物时,就大大阻碍了提取效率。因此可以推断,蛋白质在提取过程中或多或少的与在体内时真实情况不尽相同。经典 RIPA 裂解液中含有低浓度的十二烷基硫酸钠(SDS 变性剂),脱氧胆酸(干扰蛋白质间
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