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- 2025年07月15日
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文献和实验脱氧核苷三磷酸（dNTP）溶液 【配制方法】 把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节 每一dNTP溶液的pH值7.0（用pH试纸检测），把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释，在下表中给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度，然后用水稀释成终浓度为50
录： MgCl2 4ul 10×RNA PCR Buffer 2ul RNase Free dH2O 8.5ul dNTP Mixture(各10mM) 2ul RNase Inhibitor 0.5ul AMV Reverse Transcriptase 1ul Oligo dT-Adaptor Primer 1ul 样品RNA 1ul 30℃ 10min 50℃ 30min 99℃ 5min 5℃ 5min PCR： MgCl2 1.2ul 10×LA RNA PCR
于DNA 的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍。 1.变性：加热 使模板DNA在高温下(94℃)变性，双链间的氢断裂而形成两条单链，即变性阶段。 2.退火：使溶液温度降至50-60℃，模板DNA与引物按碱基配对原则互补结全，即退火阶段。 3.延伸：溶液反应温度升至72℃，耐热DNA聚合酶以单链DNA为模板，在引物的引导下，利用反应混合物中的4种脱氧核苷三磷酸(dNTP
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