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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干燥、避光、密闭、低温
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
Pyrogallol
- 供应商:
上海远慕生物有限公司
- 规格:
20mg
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文献和实验;3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品,1700×g,离心 10 min。如果样品溶解得不好,再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液,重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质,重复抽提一次,将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中;4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇,12 000 rpm 离心 2 min;5. 用 70% 乙醇洗涤,晾干,沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
ml 离心管中,以 Corex 玻璃离心管为最佳,不过塑料离心管也能使用。 4. 加入 3ml 已用 LETS 缓冲液平衡的苯酚到玻珠中。 LETS 缓冲液: 0.1 mol/L 氯化锂 0.01 mol/L Na2 EDTA 0.01 mol/L Tris-HCl (pH7.4) 0.2% SDS 0.1% 二乙基焦碳酸(可任选) 5. 用 2.5ml 冰预冷的 LETS 缓冲液悬浮
进行电泳分析。 5、 cDNA第二链合成离心管反应液70℃处理10分钟, 低速离心后置冰上。 6、 加入2μ T4 DNA聚合酶, 37℃温浴10分钟。 7、加入10μl 200mmol/L EDTA终止反应。 8、用等体积酚:氯仿抽提cDNA反应液,离心2分钟。 9、水相移至另一eppendorf管,加入0.5倍体积的7.5M醋酸铵(或0.1倍体积的1.5M醋酸钠,pH5.2), 混匀后再加入2.5倍体积的冰冷乙醇(-20℃), -20℃放置30分钟后离心5分钟。 10、 小心
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