33377-72-9标准品TFBG

定量PCR常见问题及策略你知道多少？

Q1．无CT值（信号）出现 1.反应循环数不够。一般都要在35个循环以上，可根据实验情况增加循环（如至45cycles），但高于45个循环会增加过多的背景信号。 2.检测荧光信号的步骤有误。一般SG法采用72℃延伸时采集，Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。 3.引物或探针降解。可通过PAGE电泳检测其完整性。 4.引物或探针的设计，如探针高于引物的温度不够，造成探针未杂交上而产物已延伸的情况。 5.模板量不足。对未知浓度的样品应从

实时定量PCR的原理、探测化学物质及探针优化(二)

1）为了在SG反应后作溶解曲线，引入与溶解曲线起始温度点相同的保温步骤（大约60秒），这样可以确保溶解温度起始于一个确定的温度。2）溶解曲线分析可以重复。可以在相当一段时间内重新作溶解曲线，甚至到第二天也可以。3）关于可以用SG检测的引物对的列表4） 进行SG分析的典型程序是什么？变性：检查反应所用的酶（2min，5min，10min或15min）循环：95度/20秒，退火温度/20秒，72度/20秒保温：72度/60秒溶解：72-99度，on Melt A5）在哪个通道SG可以被检测？双通道

人热休克蛋白72(HSP72)ELISA试剂盒 说明书

  上海西唐生物科技有限公司   021-55229872,  65333639   www.westang.com 人热休克蛋白72 ( HSP72 )ELISA 试剂盒   原理 本实验采用双抗体夹心  ABC-ELISA 法。用抗人   HSP72   单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的   HSP72与单抗结合，加入生物素化的抗人 HSP72 ，形成免疫复合物连接在板上，辣根