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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干燥、避光、密闭、低温
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
Cytosine
- 供应商:
上海远慕生物有限公司
- 规格:
20mg
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文献和实验脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变(见图1),行PCR扩增所需片段,则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶,最后,对PCR产物进行测序并且与未经处理的序列比较,判断是否CpG位点发生甲基化。此方法是一种可靠性及精确度很高的方法,能明确目的片段中每一个CpG位点的甲基化状态,但需要大量的克隆测序,过程较为繁琐、昂贵[27]。 图1:重亚硫酸盐处理过程示意图。DNA经重亚硫酸盐处理后,甲基化的胞嘧啶不变,未甲基化的胞嘧啶转变为尿嘧啶 2.2.3 甲基化特异性的PCR(methylation
为什么有的动物更长寿?研究了 16 个物种,科学家发现寿命长短与体细胞突变率有关……
频谱,这可以从突变数据中推断出来。 通过分析不同物种的突变谱,研究发现在不同物种之间突变谱显示出明显的相似之处。如在人类结肠中观察到,CpG 位点上的胞嘧啶-胸腺嘧啶(C to T)替代占主导地位,其在各个物种的突变谱中都占有很大比例。 根据突变谱的构成,本研究主要研究了 3 种类型的突变特征: (1)SBS1:5-甲基胞嘧啶自发脱氨基导致的突变; (2)SBSB:内源性 DNA 损伤和修复过程中导致的突变; (3)SBSC:DNA 氧化损伤导致的 C to A 替换。 研究发现,不同的突变
化位点明确,实验结果易解释;缺点是:1.由于CG不仅仅限于CCGG序列中,因此非该序列中的CG将被忽略;2.只有检测与转录相关的关键性位点的甲基化状态时,该检测方法的结果才有意义;3.相对而言,Southern方法较复杂,且需要样本的量大;4.存在着酶不完全消化引起的假阳性的问题;5.不适用于混合样本。 2.2.2 直接测序法 直接测序是由Frommer等[25]提出的研究DNA甲基化方法。过程是:重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶保持不变(见图
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