离轴抛物镜

生物显微镜的使用与保养

低于载物台的平面，以免载玻片与聚光器的镜头相碰。然后，将聚光器的固定螺丝旋紧。对非电光源的显微镜来说，最后要把反射镜插入聚光器下面的插孔内。2、校正光轴校正光轴的意义在于使物镜、目镜、聚光镜的主光轴和可变光栏的中心点重合在一条直线上。所以又叫做合轴调节或中心调节。如果光轴歪斜，会使像差增大，分辨率和清晰度都要下降。检查方法是将可变光栏开至最大，把低倍物镜旋入光轴，降低镜筒，使物镜与载物台之间的距离小于该物镜的工作距离（5mm以下）。不放标本，调节反射镜的角度，使视场最亮；或调节光源灯的亮度，使视场明暗

3D 活/死细胞测定的分析工作流程

3000 激光扫描共聚焦显微镜和半复消色差物镜（LUCPLFLN20X）在三个维度上对样品进行成像。采集条件如下所示。Z轴步进为 2μm。Hoechst 33342 使用 405 nm 激光（蓝色荧光），NucView 550 使用 561 nm 激光（洋红色荧光）。图2 显示为使用显微镜采集的未经处理和经 STS 处理的微球体积图像。未经处理经 8 天培养微球的核心区域可能因营养不足或低氧而死亡。总体而言，STS 诱导 HT-29 微球细胞死亡。  图 2：使用（右侧）和不使用（左侧）STS

显微技术（图）

，作用是使透过聚光器的光线形成空心光锥，焦聚到标本上。2、相位板（annular phaseplate）在物镜中加了涂有氟化镁的相位板，可将直射光或衍射光的相位推迟1/4λ。分为两种：　　①A+相板：将直射光推迟1/4λ，两组光波合轴后光波相加，振幅加大，标本结构比周围介质更加变亮，形成亮反差（或称负反差）。　　② B+相板：将衍射光推迟1/4λ，两组光线合轴后光波相减，振幅变小，形成暗反差（或称正反差），结构比周围介质更加变暗。 图2-8 相差显微镜照明原理   图2-9 一种介壳