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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
12个月
- 库存:
现货
- 供应商:
上海经科化学科技有限公司
- 规格:
500ml
产品名称
Scott蓝化液
保存条件
室温
保质期
12个月
产品类别
HE染色
用途
又称促蓝液,用于苏木素染色后蓝化,尤其推荐用于Gill'sⅢ蓝化苏木素蓝化。
备注
主要由硫酸镁、碳酸氢钠等组成。
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文献和实验一、预处理 1. 脱蜡至水 (1)二甲苯5分钟,2次 (2)100%酒精1分钟,2次 (3)95%酒精1分钟,1次 (4)85%酒精1分钟,1次 (5)双蒸水1分钟,3次 2. 加热预处理 (1)热预处理液(试剂盒内带)加热至98-100℃时,放入切片,15-20分钟。 (2)双蒸水洗1分钟,3次 3. 胃蛋白酶消化 (1)将胃蛋白酶先放入37℃温箱预热,然后滴加至组织上。 (2)室温,5-30分钟(其间用显微镜观察
情况而定) 3、每张切片加1滴3% H2O2,室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS 冲洗3×3'。 4、除去PBS 液,每张切片加1滴相应的第一抗体(相应稀释倍数),室温下孵育2小时。 5、PBS 冲洗3×5'。除去PBS液,每张切片加1滴聚合物增强剂(试剂A),室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3'。 6、除去PBS液,每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物(试剂B),室温下孵育30min。PBS冲洗3×5'。
以酸性12~15%的福尔马林最佳。大标本(2cm厚)一般需要6~12个小时,小标本一般需要3~6个小时;当室温低18℃时,可在37℃以下的温箱内加温4~6个小时。由于HE染色最佳着色PH为3.5~4.5, 中性福尔马林对苏木素染色有一定影响,细胞核容易发灰,核染色质不佳。 所以, 尽管中性福尔马林对抗原有很好的保存作用,但酸性福尔马林对绝大多数抗原来说也有很好的保存作用,所以在没有特别处理的情况下常规HE用12~15%酸性福尔马林也可以(每100毫升12~15%福尔马林液内加5毫升
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