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- 保存条件:
15°C避光避潮保存
- 保质期:
1年以上
- 英文名:
X-α-gal
- 库存:
大量
- 供应商:
solarbio
- CAS号:
107021-38-5
- 规格:
10mg/100mg
| 规格: | 10mg | 产品价格: | ¥400.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100mg | 产品价格: | ¥2400.0 |
英文名称:X-α-gal
别名 : 5-溴-4-氯-3-吲哚-a-D-半乳糖苷
cas:107021-38-5
分子式:C14H15BrClNO6
分子量:408.63
X-α-gal 纯度 : 95%
X-α-gal 外观(性状) : 白色或灰白色结晶粉末,或者无色结晶
储存条件 : -15°C避光避潮保存
产品信息:
X-α-Gal是一种酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的显色底物,用于在培养基上直接检测GAL4系统的酵母双杂交作用。通过蓝白颜色筛选,快速和简便地识别阳性的蓝色克隆,无需费时的β-半乳糖苷酶报告基因检测。
X-α-Gal检测酵母MEL1基因的激活,MEL1是GAL4酵母双杂交系统的一个报告基因,编码分泌型的α-半乳糖苷酶。该酶可水解无色的X-α-Gal底物并最终产生蓝色产物。表达α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培养基上显蓝色,即阳性的双杂交作用。
x-a-gal a-半乳糖苷酶显色底物用途:
(1)α-半乳糖苷酶的显色底物,形成蓝色沉淀。在培养基上直接检测酵母双杂交相互作用,利用此底物可以省去双杂交体系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays;
(2)用于区分肠杆菌科内的不同菌种以及区分双歧杆菌和乳酸菌;
(3)在组织化学中用于酶活性的检测;
x-a-gal a-半乳糖苷酶显色底物
储存液的配制及使用步骤:
A)涂布于预制平板:溶解24mg X-α-gal于6 mL DMF,终浓度为4mg/ mL的溶液。
①涂布200ul(15cm) 或者100ul(10cm)X-α-gal 储存液于预制平板上;
②放于37℃培养箱至液体被吸收(由于DMF挥发性低,最长可放4小时);
③将转化细菌或酵母涂于平板上,于37℃或30℃培养直至蓝色菌落出现。
B)直接加入琼脂中:溶解60mg X-α-gal于3 mL DMF,终浓度为20mg/ mL的溶液。
①将已灭菌琼脂培养基冷却至50-55 ℃;
②往已冷却的培养基中直接加入2 ml -10 ml 20 mg/ ml X-α-Gal储存液,混匀,快速倒平板。
外观:白色或灰白色结晶粉末,或者无色结晶;
溶解度(1%甲醇溶液):无色,清澈;
储存:-15°C避光避潮保存;
x-a-gal a-半乳糖苷酶显色底物

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文献和实验pengchen628 各位前辈现有一个问题请教。 我是将Tie2/LacZ小鼠的骨髓单个核细胞移植到FVB小鼠身上,现在骨髓移植已经成功。我想鉴定FVB小鼠身上是否有LacZ基因,应该采取什么方法? 注:转基因的Tie2/lacZ小鼠可以在内皮细胞专有启动因子Tie2的转录调控下持续表达β-半乳糖苷酶,可与X-gal染色成蓝色,被广泛用于细胞谱系分析。 十分感谢! wbald 你都已经说了,X-gal
系列载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组 体。 二、使用方法 : 首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的琼脂培养基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg
段与宿主菌其余肽段结合成有活性的β-半乳糖苷酶。此酶能使显色底物X-gal分解成蓝色化合物,从而使菌落发蓝。若有外源片段插入载体的多克隆位点,则使β-半乳糖苷酶基因失活,不能产生α肽,形成白色菌落。利用此方法仅通过目测就轻而一举地筛选出重组菌落。一、材料,试剂和仪器1 材料: 受体菌DH5α ,含lacZ`的重组质粒。2 试剂:1)LB固体培养基2)LB液体培养基4)0.1mol/L CaCl25)抗生素母液6)0.5mol/L IPTG7)100mg/ml X-gal3仪器: 恒温摇床,冰冻离心
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