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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
—20℃,避光,12个月
- 库存:
100
- 供应商:
上海远慕生物
- 规格:
100ml
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文献和实验一般使用辣根过氧化物酶 HRP-ECL 发光法或碱性磷酸酶 AP-NBT/BICP 显色法。 1.HRP-ECL 发光法: 将 A、B 发光液按比例稀释混合。膜用去离子水稍加漂洗,滤纸贴角吸干,反贴法覆于 A、B 混合液滴上,熄灯至可见淡绿色荧光条带(5 min 左右)后滤纸贴角吸干,置于保鲜膜内固定于片盒中,迅速盖上胶片,关闭胶盒,根据所见荧光强度曝光。取出胶片立即完全浸入显影液中 1~2 min,清水漂洗一下后放在定影液中至底片完全定影,清水冲净晾干,标定
-7.4 )稀释细胞悬液,细胞浓度达到 100 万 /ml 左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的 PBS , PH7.4 。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持 2-8 ℃的温度。加入一定量的 PBS ( PH7.4 ),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20 分钟左右( 2000-3000 转 / 分)。仔细收集
Histochemical staining of sea urchin embryos for alkaline phosphatase (AP) enzyme activity
to settle. Carefully remove supernatant. 2. Resuspend in 0.5 ml AP substrate buffer. Allow embryos to settle for 10 min. Remove excess buffer. 3. Add 100 ul AP substrate to tubes. Check for staining after 5 minutes by transferring a small sample
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