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上海笃玛
12500
6个月
2-8℃
96T/48T
santa中国代理商
免疫试剂盒
进口:vitlab移液器、Thermo移液器、socorex移液器、Rainin移液器、Nichiryo移液器、Labnet移液器、枪头、瓶口分液器、连续式吸头、连续等分移液器
产品特点 1. 便捷快速:与Lowry法相比,elisa试剂盒方法可在1 小时内完成蛋白质定量检测,工作液配制后24h内使用无影响。 2. 灵敏准确:测定范围是20~2000 ug/ml(562 nm读数)。在测定范围内有良好的线性关系,变异系数小。 3.兼容性好:与Bradford法相比,对去垢剂耐受能力大为提高,在Tween20低于4%,NP40低于5.0%,SDS低于4%,Triton X-100 低于4%的浓度范围内, 4. 即可获得准确定量结果(其余物质耐受度详见说明书)。使用微板法测定时将体积按比例减小。
订货说明:
1.当天下午3点30分之前下单,可当天发货。
2.进口期货货期一般3-4周,部分产品现货请咨询业务人员。
3.客户对定制产品有特殊要求,要提前备注。
4.送货方式:快递上门,如特殊产品业务员亲自派送。
5.客户收到产品,如发现产品有破损及时与我司联系,我司会在第一时间处理。
6.笃玛品质保证,价格优势。生物种类试剂齐全,欢迎广大客户咨询订购。
1.试剂盒的保存:未开封试剂盒请置于2-8℃环境中储存,并在有效期内使用;已开封试剂盒,请尽快使用,避免稀释液长菌或组份降解失效;切勿酶标板置于-20℃环境中储存,底物溶液保存或使用时请务必避光。
2.工作试剂配制:请临用前30分钟内配妥。初次使用,各组份试剂请务必摇匀或离心,以便试剂集中到管底;因实际装量多余标示装量多余标示装量,配制工作试剂请用精准的计量工具(移液枪或量筒等)量取,切勿不经量取直接使用。
3.酶标板:铝箔袋出现漏气并不影响板的储存及使用;酶标板条可拆卸,每次根据实验需要量取孔进行操作,切勿不经拆卸用整块板来进行预实验。
4.上样:一次加样时间推荐控制在5分钟以内,并保证每孔上样量一致,以确保反应一致性。
5.孵育:实验中为防止样本蒸发或污染,请于酶标板上加盖或覆膜,稳拿轻放,防止外溅;随时观察温箱温度是否恒定于37℃,及时调整,孵育反应期间,温箱不宜开启太多次,以免影响温度平衡。
6.洗涤:确保蒸馏水水质合格;为保证每孔上样量一致,请使用多通道移液枪操作,若采用洗板机,请确保洁净度,以免污染;切勿冲洗,洗涤力道适中,垂直甩板,充分洗涤,降低边缘效应。
7.组份:不同批次实际,不可混用;不同组份瓶盖间避免交叉使用,以免污染;切勿随意替换试剂盒中组份。
8.读值:加入终止液后,请在5分钟之内读数,最迟不超过15分钟,以免产生褐色沉淀物,影响吸光度;请确保酶标仪的设置无误,滤光片经校准合格。
santa中国代理商
老师您好:
我是上海笃玛生物科技有限公司的杨燕燕,看到您在丁香通上的留言需要,如果您需要资料或者需要订购,请联系:021-60520536 15921657703
我司代理的品牌:试剂:Sigma、TCI、Amresco、Aldrich、Fluka、MERCK、Roche
生物试剂及耗材:R&D、Abcam、santan cruz、CST、 Cayman、ClioCell、Gibco、Invitrogen、Axygen、Costar、Gilson、Eppendorf、Nichipet、Dragonmed、GE Healthcare等
笃玛生物外包实验免疫组化、TUNEL(凋亡)实验、原位杂交实验、HE染色、特殊染色、免疫印迹(WB),免费代测ELISA实验。
1.提供原始实验记录本及原始电子数据,包括原始图片、胶片、机图等并与最终出具的实验报告相匹配,确保实验数据与结果真实可靠。
2.严格的质控标准。
3.定期汇报项目进展情况,对问题及时进行沟通反馈。
4.所有实验所用试剂及原始数据3-6月保存,有据可查。
合作客户:上海医药,仁济医院,新华医院,上海药物所,二军大,北京中医药大学
有专业的技术服务和完善的售后体系,不必烦恼实验中遇到的问题,不必担心产品的售后,笃玛生物统统为您解决。
您好,定制抗体的价格为每个抗体6400元,抗体制备周期为2.5-3个月。
流程为:分析蛋白序列选择抗原片段——合成抗原片段,偶联载体蛋白——免疫动物(多次免疫、采样、检测)——取血清,检测——纯化——交货
我们提供的产品包含:
20ml兔抗原血清,可纯化得到特异性抗体,也可直接用于检测试验
10mg纯化好的兔IgG特异性抗体,由血清纯化得到
1-3mg多肽抗原,用于检测抗体的效价
鸡蛋蛋清中C型溶菌酶检测
实验目的:
检测蛋清中C型溶菌酶的含量。
实验样本:
鸡蛋蛋清,客户提供。
样本数量:
86个。
santa中国代理商
样本处理步骤:
1.样本清点:对客户送样进行统计编号,对所有样本进行统计登记。
2.样本稀释。按照客户指南,蛋清仅经过取样,搅拌,未进行稀释。根据之前的经验,蛋清属于高蛋白样本,需要提前稀释样本。随机取3个样本,用0.8%生理盐水进行100,200,500,1000倍稀释(考虑到上样时还需进行5倍稀释,故此梯度不用拉太大),进行简单的蛋白定量跟上样检测。结合预实验的结果跟参考文献,选定200倍稀释。
检测步骤:
1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
3.样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.加入50μL终止液使反应停止,450nm处检测光吸收值。
所用仪器:
帝肯Infinite F50酶标仪
操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。
为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注:
1. 用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2. 每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N 。测量时先用此孔调OD值至零。
3. 为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4. 未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5. 建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
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操作常见问题解析:
1.加样?
在现在的ELISA商品试剂盒中,必然有使用微量加样器加入样本的步骤。注意的关键点是:加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以,有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性,下次测定为阴性,往往就是上述加样及试剂的错误所致。
2.边缘效应
使用96孔板的ELISA测定中,常发现有“边缘效应",即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体,在实验室的常规ELISA测定中,将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱,板也升温时,在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时,将板和溶液均加热至温育温度(如37℃),就可以很容易地排除“边缘效应",并且可提高测定的重复性。
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