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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃
- 克隆性:
多克隆
- 适应物种:
Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Guinea Pig,
- 宿主:
兔
- 应用范围:
WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
- 浓度:
1mg/1ml
- 抗体英文名:
Anti-ABCB6 antibody
- 抗体名:
ATP结合蛋白家族6抗体,Anti-ABCB6 antibody
- 规格:
0.1ml
产品编号DM-1224R
英文名称ABCB6
中文名称ATP结合蛋白家族6抗体
别 名ABC; ABC14; EST45597; ABC 14; ABC-14; ABCB 6; ABCB-6; PRP; UMAT; ABC transporter umat; MTABC3; Mt-ABC transporter 3; umat; Mitochondrial precursor; Mitochondrial ABC transporter 3; Mitochondrial abc protein 3; ATP-binding cassette, sub-family B, member 6, mitochondrial precursor; ATP binding cassette, sub family B (MDR/TAP), member 6; P glycoprotein related protein; Abcb6; ABCB6_HUMAN; ATP binding cassette sub family B member 6, mitochondrial precursor; ATP-binding cassette sub-family B member 6; Mitochondrial ABC transporter 3; mitochondrial; Mt ABC transporter 3; P-glycoprotein-related protein; Ubiquitously-expressed mammalian ABC half transporter; UMAT; Ubiquitously expressed mammalian ABC half transporter.
抗体来源Rabbit
克隆类型Polyclonal
交叉反应Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Guinea Pig,
产品应用WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
分 子 量94kDa
细胞定位细胞膜 线粒体
ATP结合蛋白家族6抗体,Anti-ABCB6 antibody
我司代理的品牌:试剂:Sigma、TCI、Amresco、Aldrich、Fluka、MERCK、Roche
生物试剂及耗材:R&D、Abcam、santan cruz、CST、 Cayman、ClioCell、Gibco、Invitrogen、Axygen、Costar、Gilson、Eppendorf、Nichipet、Dragonmed、GE Healthcare等
ATP结合蛋白家族6抗体,Anti-ABCB6 antibody
笃玛生物外包实验免疫组化、TUNEL(凋亡)实验、原位杂交实验、HE染色、特殊染色、免疫印迹(WB),免费代测ELISA实验。
1.提供原始实验记录本及原始电子数据,包括原始图片、胶片、机图等并与最终出具的实验报告相匹配,确保实验数据与结果真实可靠。
2.严格的质控标准。
3.定期汇报项目进展情况,对问题及时进行沟通反馈。
4.所有实验所用试剂及原始数据3-6月保存,有据可查。
合作客户:上海医药,仁济医院,新华医院,上海药物所,二军大,北京中医药大学
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A8486 Nitrofurazone 59-87-0 5mg
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文献和实验标本的采集及保存
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一晚后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 (注:标本溶血会影响**检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。)
标本的稀释原则:首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量,确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内,检测的结果才是准确的。稀释的过程中,应做好详细的记录。计算浓度时,稀释了“N”倍,标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则:2瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为300 pg/ml,做系列倍比稀释后,分别稀释300 pg/ml,150 pg/ml,75 pg/ml,37.5 pg/ml,18.5 pg/ml,9 pg/ml,4.5 pg/ml,样品稀释液直接作为标准浓度0 pg/ml,临用前15分钟内配制。 如配制150 pg/ml标准品:取0.5ml(不要少于0.5ml)300 pg/ml的上述标准品加入含0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
生物素标记抗体的稀释原则:临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl生物素标记抗体加990μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则:临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔100μl),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根过氧化物酶标记亲和素加990μl辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
操作步骤
实验开始前,请提前配置好所有试剂,试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时,用样品稀释液进行稀释,以使样品符合试剂盒的检测范围。
1.加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加生物素标记抗体工作液 100μl(取1μl生物素标记抗体加99μl生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制),37℃,60分钟。
3.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
4.每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液(同生物素标记抗体工作液) 100μl,37℃,60分钟。
5.温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.依序每孔加终止溶液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8.用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
注意事项
1.用户在初次使用试剂盒时,应将各种试剂管离心数分钟,以便试剂集中到管底。
2.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是加底物溶液及2N 。测量时先用此孔调OD值至零。
3.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
4.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。标准品、生物素标记抗体工作液、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的标准品、生物素标记抗体工作液或、辣根过氧化物酶标记亲和素工作液。
5.建议检测样品时均设双孔测定,以保证检测结果的准确性。
洗板方法
手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
计算
以标准物的浓度为横坐标(对数坐标),OD值为纵坐标(普通坐标),在半对数坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2.洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3.一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。
5.如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请乘以稀释倍数。
6.在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7.底物请避光保存。
8.不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。
注意事项:收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本, 将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存。避免反复冻融。标本2 -8 ℃可保存48 小时,-20 ℃可保存1 个月。-70度可保存6 个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。
计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒性能
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。
2.批内与批见应分别小于9%和15%
相关实验
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蛋白激酶的分析是使用标记的供体底物,当酶样品中含有磷酸转移酶活性时,蛋白 质或多肽受体底物中标记物的积累就很容易被检出。
内容来源于《精编分子生物学实验指南(第五版)》
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目前市场上的 ELISA 试剂盒质量参差不齐,如何去挑选适合自己的试剂盒就显得特别重要,具体有以下几点可供参考。特异性ELISA 试剂盒的特异性与试剂盒的关键组分,抗体对有关。若抗体对中之一为多抗,另一个必须为单抗,建议使用双单抗。灵敏度灵敏度反映的是试剂盒检出被检物质的最低量的能力,用户
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内容来源于《精编分子生物学实验指南(第五版)》
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