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动物组织DNA试剂盒
| 规格 | 价格 |
| 50次制备 | 450 |
| 250次制备 | 1850 |
无须酚氯仿抽提及异丙醇沉淀步骤。
核酸纯化柱可最多可吸附15 μg 总DNA。
适合从≤25 mg新鲜的或者是冷冻贮藏的人或动物组织中分离纯化总DNA(包括基因组DNA、线粒体DNA及可能存在的病毒DNA)。
· 经典蛋白酶K消化步骤,适合从各种不同来源的动物组织中分离纯化DNA。
· 无须酚氯仿抽提及异丙醇沉淀步骤。
· 核酸纯化柱可最多可吸附15 μg 总DNA。
· 起始样品体积:≤25mg新鲜或者是冷冻贮藏的人或动物组织。
· 所需仪器:可适合2ml离心管使用的离心机。
右图:
4个小鼠组织样品用Simgen动物组织DNA试剂盒分离纯化的基因组DNA,经1.0%TAE琼脂糖凝胶电泳效果。
M: Lambda-Hind III Ladder
1: 心脏组织
2: 肝脏组织
3: 肺部组织
4: 肾脏组织
产品原理
组织样品经蛋白酶K消化后,用柱纯化核酸技术过滤除去降解的蛋白,吸附在纯化柱上的总DNA经Buffer WA和Buffer WB洗涤后,可彻底清除残留在纯化柱上的杂质及PCR抑制物。纯化柱上的总DNA直接用Buffer TE或水洗脱,并可立即用于各种分子生物学实验。
操作步骤在分散的组织标本中加入蛋白酶K和酶解缓冲液,温育降解蛋白并释放DNA。加入乙醇调整溶液的柱结合条件,再将溶液加入纯化柱上经过结合、清洗步骤去除残留的杂质后,DNA即可被TE溶液洗脱下来。
适用的分子生物学实验
1. 不同长度的PCR
2. RFLP分析
3. Southern blotting
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文献和实验动物组织总 RNA 提取试剂盒操作指南(DP431) ——动物组织
以下操作按照天根产品 DP431 动物组织总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 动物组织(50-100 mg)2. 无水乙醇 ,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I 配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml);1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 研磨器 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文
哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解,以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料:Trizol试剂(Invitrogen公司)研钵,匀浆器,镊子,铝箔都高温灭菌即可;二、具体过程:1、样品在离体后应迅速冷冻在液氮中,若是比较大块的组织,要尽量把组织剪切成黄豆大小的块,使液氮迅速渗透到组织内部而防止组织内部的RNA降解。组织用铝箔包好或放入冻存管中,并做好记号,注意不要把记号写在纸上,以防纸被组织的血水渗透
实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法 实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙醇沉淀水相中的RNA,并用70%乙醇洗涤沉淀,这样就可以得到比较纯净的总RNA. 实验步骤: ① 先在研钵中加入液氮,再将组织剪成小块在液氮中磨成粉末,用液氮预冷
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