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-20℃
- 英文名:
Recombinant 2',3'-Cyclic Nucleotide 3'-Phosphodiesterase (CNP)
- 库存:
1000
- 供应商:
上海信裕
| Organism species | Mus musculus (Mouse) |
| Product No. | RPC269Mu01 |
| Source | Prokaryotic expression |
| Host | E.coli |
| Purity | > 90% |
| UOM | 50ug |
| Predicted Molecular Mass | 32.5kDa |
| Concentration | n/a |
| Applications | SDS-PAGE; WB; ELISA; IP. |
| Endotoxin Level | <1.0EU per 1µg (determined by the LAL method) |
| Residues | Tyr110~Glu365 with two N-terminal Tags, His-tag and T7-tag |
| Formulation | Supplied as lyophilized form in 20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% sarcosyl, 5% trehalose, and preservative. |
Y CRRDIRVLVL DDTNHERERL DQLFEMADQY QYQVVLVEPK TAWRLDCAQL KEKNQWQLSA DDLKKLKPGL EKDFLPLYFG WFLTKKSSET LRKAGQVFLE ELGNHKAFKK ELRHFISGDE PKEKLELVSY FGKRPPGVLH CTTKFCDYGK AAGAEEYAQQ EVVKRSYGKA FKLSISALFV TPKTAGAQVV LTDQELQLWP SDLDKPSASE GLPPGSRAHV TLGCAADVQP VQTGLDLLDI LQQVKGGSQG EAVGE
Stability Test: The thermal stability is described by the loss rate of the target protein. The loss rate was determined by accelerated thermal degradation test, that is, incubate the protein at 37oC for 48h, and no obvious degradation and precipitation were observed. (Referring from China Biological Products Standard, which was calculated by the Arrhenius equation.) The loss of this protein is less than 5% within the expiration date under appropriate storage condition.
Protein bands: 10kDa, 14kDa, 18kDa, 22kDa, 26kDa, 33kDa, 44kDa and 70kDa.
Double intensity bands: The 26kDa, 18kDa, 10kDa bands are at double intensity to make location and size approximation of proteins of interest quick and easy.
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文献和实验X-100或脱氧胆酸钠)和低浓度变性剂(2mol/L尿素或盐酸胍等)洗涤除去脂类和膜蛋白,这一步很重要,否则会导致包涵体溶解和复性的过程中重组蛋白质的降解[6、7、8]。 包涵体的溶解必须用很强的变性剂,如8mol/L尿素、6~8mol/L盐酸胍,通过离子间的相互作用破坏包涵体蛋白间的氢键而增溶蛋白。其中尿素的增溶效果稍差,异氰盐酸胍最强;去污剂,如SDS[7],可以破坏蛋白内的疏水键,可以增溶几乎所有的蛋白,但由于无法彻底去除而不允许用在制药行业中;酸,如70%甲酸[9],可以破坏
质芯片检测。此外,肽芯片或基于质谱的方法[ 20,21] 也可以用于这方面。 我们在此介绍基于蛋白质芯片技术的蛋白磷酸化筛选方法和高通量确定蛋白激酶底物的方法。我们已成功地用这种筛选工具鉴定大麦酪蛋白激酶 2α ( CK 2α) 和不同的拟南芥丝裂原活化蛋白(MAP) 激酶 [23] 的新靶标。我们这个方法使用本书第 28 章详细描述的植物蛋白质芯片(见第 28 章)。在放射性【 γ33 磷】三磷酸腺苷存在的条件下,用可溶和具有活性的激酶孵育芯片。通过磷屏成像仪或 X 射线胶片检测到的放射性信号,对可能
包涵体表面吸附的大部分不溶性杂蛋白。洗涤液pH以与工程菌生理条件相近为宜,使用的还原剂为0.1-5mM。EDTA为0.1-0.3 mM。去垢剂如Triton X-100、脱氧胆酸盐和低浓度的变性剂如尿素充分洗涤去除杂质,这一步很重要,因为大肠杆菌外膜蛋白Omp T(37 KDa)在4-8mol/L尿素中具有蛋白水解酶活性,在包涵体的溶解和复性过程中可导致重组蛋白质的降解。 1.2.5 DNA片段分析 SGC-7901感染Ad-p27mt和Ad-LacZ 48 h后离心去上清, 在剩余细胞
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