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96T
昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒
昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫羧酸酯酶(CES)水平。用纯化的昆虫羧酸酯酶(CES)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入羧酸酯酶(CES),再与HRP标记羧酸酯酶(CES)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的羧酸酯酶(CES)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中昆虫羧酸酯酶(CES)的活性。
昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒组成:
| 试剂盒组成 |
48孔配置 |
96孔配置 |
保存 |
| 说明书 |
1份 |
1份 |
|
| 封板膜 |
2片(48) |
2片(96) |
|
| 密封袋 |
1个 |
1个 |
|
| 酶标包被板 |
1×48 |
1×96 |
2-8℃保存 |
| 标准品:1800pg/ml |
0.5ml×1瓶 |
0.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 标准品稀释液 |
1.5ml×1瓶 |
1.5ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 酶标试剂 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 样品稀释液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 显色剂A液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 显色剂B液 |
3 ml×1瓶 |
6 ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 终止液 |
3ml×1瓶 |
6ml×1瓶 |
2-8℃保存 |
| 浓缩洗涤液 |
(20ml×20倍)×1瓶 |
(20ml×30倍)×1瓶 |
2-8℃保存 |
昆虫羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
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