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文献和实验基或者 PBS 稀释,再用 200 目筛网,除去残留的组织块,并使用5~10倍体积的 1640 基础培养基或者 PBS 缓冲液洗涤一次,过滤至无组织块为止,获得单细胞悬液。 收集细胞悬液,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞,并调整细胞浓度至 1×107/mL。 研磨法 提前准备好 200 目的一次性细胞筛网,用 1640 基础培养基或者 PBS 润湿并浸泡备用(浸泡放置于 6 cm 细胞培养皿或者 6 孔板)。 将剥离的肿瘤组织转移到 200 目的细胞筛网,用无菌眼科
。 Eppendorf今年推出全新的细胞培养 耗材适用于贴壁和悬浮细胞的培养和分析。Eppendorf新款细胞培养耗材 着重于人性化的设计细节,如细胞培养皿和细胞培养板的易握式设计,以及细胞培养瓶的拉链式可重复密封的包装。而针对细胞培养实验中经常发生的交叉污染和边缘效应,Eppendorf细胞培养板的Chimney-well独立孔井设计将会带来极大的改善。 新款Eppendorf细胞培养耗材依据最高质量标准而生产,其生产符合ISO 9001和ISO 13485标准,并经过严格
缓冲液(湿转)25 mM Tris 碱190 mM 甘氨酸20% 甲醇测定 pH,pH 应为约 8.3。必要时进行调节。对于大于 80 kDa 的蛋白质,我们推荐加入最终浓度为 0.1% 的 SDS。转膜缓冲液(半干转)48 mM Tris39 mM 甘氨酸20% 甲醇0.04% SDS封闭缓冲液5% 奶粉或 BSA(牛血清白蛋白)加入 TBST 缓冲液中。混匀并过滤。过滤失败可能导致出现「斑点」,其中微小的黑色颗粒会在显色过程中污染印迹。实验步骤一、样品裂解◇ 制备细胞培养物裂解物1. 将细胞培养皿置于
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