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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
鼎国昌盛
- 规格:
10个/包,600个/箱
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文献和实验基或者 PBS 稀释,再用 200 目筛网,除去残留的组织块,并使用5~10倍体积的 1640 基础培养基或者 PBS 缓冲液洗涤一次,过滤至无组织块为止,获得单细胞悬液。 收集细胞悬液,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬细胞,并调整细胞浓度至 1×107/mL。 研磨法 提前准备好 200 目的一次性细胞筛网,用 1640 基础培养基或者 PBS 润湿并浸泡备用(浸泡放置于 6 cm 细胞培养皿或者 6 孔板)。 将剥离的肿瘤组织转移到 200 目的细胞筛网,用无菌眼科
小鼠单个核细胞的分离 基本方案:从脾脏、胸腺和淋巴结制备细胞悬液 实验材料:1. RPMI-5或DMEM-5完全培养基2. 新鲜分离的小鼠器官:≤6周龄的小鼠胸腺;6周至6个月龄的小鼠脾脏和淋巴结3. 60mm×15mm培养皿4. 剪刀和镊子(保存在70%乙醇的烧杯中5. 装有19G针头的6ml注射器6. 200μm尼龙滤网 实验方法:1. 将新鲜分离的器官放入盛有3ml RPMI-5或DMEM
瓶,否则细胞成团脱落;MEF成团后铺板不均,密度窗口随即失控。 5.【终止与收集】加入完全培养基终止消化,轻轻吹打为单细胞悬液,计数。 6.【离心】约200×g离心5min,弃上清;加入完全培养基轻轻重悬。 7.【传代】按1:3-1:6的比例传代,每3天按3×10⁵个/60mm细胞培养皿(约1.2×10⁶个/10cm细胞培养皿)传代一次。固定节奏传代可最大化延缓衰老窗口。 8.【镜检】镜下确认分散均匀后放入培养箱;换液每2-3天一次。 注意:每代都应记录代次(P值);P5以后细胞增殖明显放缓,关键实验应
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