培养管、细胞培养管、细菌培养管

用比浊法测定大肠杆菌的生长曲线

的另二支培养管，按无菌操作法加入l mL无菌酸溶液，摇匀后放回摇床上，继续振荡培养，于培养8 h和14 h后取出放冰箱中贮存，待测定。加富营养物处理。余下的二支培养管于培养6 h后取出，按无菌操作法加入浓缩5倍的牛肉膏蛋白胨培养液1 mL，摇匀后，继续进行振荡培养，于培养8 h和14 h后取出，放入冰箱中贮存，待测定。 3. 比浊：将培养不同时间、形成不同细胞浓度的细菌培养液进行适当稀释，使光密度值在0.0-0.4范围内，以未接种的牛肉膏蛋白胨液体培养基调零点，在光电比色计上，选用400

噬菌体扩增、测滴度方法

恒温箱中预温，准备水浴箱等测滴度用品；11：00：用LB培养液以100/1000倍系列稀释噬菌体。微波炉中溶化顶层胶，每3mL分装在一个无菌培养管中，每个稀释度的噬菌体一个，将这些培养管置于45°C水浴中备用；11：30：每200ul细菌培养物分装到微量离心管中。每个噬菌体稀释度10uL分别加到上述细菌培养物中，室温下孵育1－5分钟。转到上述含顶层胶的无菌培养管中，快速混悬，立即铺到预温的LB/IPTG/Xgal平皿上，倾斜平皿使顶层胶铺匀。室温下冷却平皿5min，倒置，37°C培养过夜。第四

噬菌体扩增及滴度测定

，离心弃上清，加200ulTBS重悬沉淀，此为阳性噬菌体扩增液。经几轮扩增至所需的滴度。10：30将IPTG/Xgal平皿板放入370C恒温箱中预温，准备水浴箱等测滴度用品。11：00用LB培养液以100/1000倍系列稀释噬菌体。微波炉中溶化顶层胶，每3ml分装在一个无菌培养管中，每个稀释度的噬菌体一个，将这些培养管置于450C水浴中备用。11：30每200ul细菌培养物分装到微量离心管中。每个噬菌体稀释度10ul分别加到上述细菌培养物中，室温下孵育1－5分钟。转到上述含顶层胶的无菌培养管中，快速