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【蛋白质免疫共沉淀】IP

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  • 2025年07月16日
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    蛋白质免疫共沉淀技术(也被称为免疫共吸附或者免疫下拉技术)能够从原始的细胞裂解物中分离并富集目标蛋白。免疫共沉淀是利用抗原和抗体特异性结合以及细菌的Protein A/G特异地结合到免疫蛋白的Fc片段的现象开发出来的方法。其原理是,在细胞裂解液中加入抗目的蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于sepharose beads上的proteinA/G,与细胞中有目的蛋白结合,就形成一种复合物:目的蛋白-抗目的蛋白抗体-protein A/G,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物又被分开。然后经免疫印迹或质谱检测目的蛋白。
    这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与目的蛋白天然结合,符合体内实际情况,得到的结果可信度高。这种方法常用于检测两种目的蛋白是否在体内结合,也可用于一种特定蛋白质的新的作用搭档。

    应用范围
    免疫共沉淀一般用于低丰度蛋白的富集和浓缩,为 SDS-PAGE 和 MS 质谱分析鉴定准备样品,用于研究蛋白间的相互作用。

    送样要求
    标本尽可能新鲜;细胞数为106以上。
    异地不能收取样本时,请采用快递方式,样本放置在干冰中快递。

    客户提供信息
    检测抗体的名称、货号。
    样品种属,样品类型(组织、细胞、血液)。
    检测样品数量。

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    • 免疫共沉淀(co-IP)实验案例分享

      —— co-IP 检测 Hsp90 与 Cdc37 结合情况1、实验材料SKBR3 细胞,PMSF(Amresco,cat:329-98-6),cocktail(上海晶莱生物),脱脂奶粉(cat:66196131T),β-actin(上海晶莱生物)。Anti-Hsp90(santa,cat:sc-69703)、Anti-Cdc37(santa,cat:sc-13129)、Protein A+G agrose(Beyotime),细胞刮,4 度离心机(eppendorf,centrifuge

    • 免疫共沉淀(Co-IP)详细步骤教程

      一、原理:免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X,那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。目前多用精制的prorein A预先结合固化在argarose的beads上,使之与含有抗原的溶液及抗体反应后,beads

    • Co-IP 免疫共沉淀实验对照设置和 trouble shooting

      最近在不同技术论坛上溜达加上客户的来电咨询,发现 Co-IP 免疫共沉淀的实验小伙伴做得并不是很顺利,遇到的问题也是千奇百怪,有什么条带也没有检测到的,有泳道一片漆黑的,有出了条带但位置大小还不对,真是让小伙伴们伤透了脑筋,万变不离其踪,做实验之前我们先系统地的了解一下实验各个环节的一些基本概念和注意事项,以及如何设置完整的对照以便出问题时快速分析原因。免疫共沉淀实验原理介绍: 免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation),简称 Co-IP,其原理是当细胞在非

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