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文献和实验Protease 是一种由人鼻病毒 14 型的 3C 蛋白酶和 GST 组成的融合蛋白。它可以特异性的将 pGEX-6P 系列等载体表达出的带有酶底物识别氨基酸序列融合蛋白的 GST 标签进行分离。由于其自身带有 GST 标签,Prescission Protease 能在单一步骤实现 GST 标签的柱上酶切和蛋白质纯化。此蛋白酶在低温条件下具有最佳活性,因此低温孵育不仅可以保证 GST 标签的高效去除,也能维持目标蛋白的活性。 Thrombin 和 Factor Xa 常温下具有较高的酶活,当选
接上Ni柱,然后在柱上复性.丁香园网友wangcaixia1认为:我用的是pGEX-6p-1载体,我想问的是复性缓冲液可以重复利用吗?也就是可以用过一次后,再用来复性其他蛋白吗?丁香园网友panmo2006认为:完全可以啊,但是你不要忽视了使用后的复性液里面各种成分的浓度(如尿素、氧化型还原型谷胱甘肽的等)都要发生变化,那你下次再处理该蛋白时,你的条件怎么确定呢,就是说重复性很难把握。
X-3 pGEX-6P-1 pGEX-6P-2 pGEX-6P-3 五.PTYBsystem PTYB1 PTYB2 PTYB11 PTYB12 六.真核表达载体 pCDNA3.1(-) pCDNA3.1( ) pPICZalphaA pGAPZαA
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