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pGEX-6P-1载体

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    载体类型:原核表达载体。载体宿主:大肠杆菌(E.coli)细菌抗性:氨苄(Ampicillin)。测序引物:M13通用引物系列pGEX系列载体简介:pGEX载体是带有GST标签的表达载体,GST标签可以增加目的蛋白的溶解度,很便利地对目的蛋白进行表达、纯化和检测。融合蛋白可以很方便地从细菌细胞裂解液中用Glutathione Sepharose 等柱料吸附纯化。pGEX载体的特点:pGEX载体带有一个tac起动子,可作诱导表达用;可以适用于任何大肠杆菌;可以用温和的洗脱条件从亲和介质上洗脱下来,最大限度地减少对抗原性的活性的损伤;具有Prescission,thrombin 或factor Xa proteinase识别位点,可以将目的蛋白从融合蛋白中切下来。

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    • 柱上酶切那点事儿

      Protease 是一种由人鼻病毒 14 型的 3C 蛋白酶和 GST 组成的融合蛋白。它可以特异性的将 pGEX-6P 系列等载体表达出的带有酶底物识别氨基酸序列融合蛋白的 GST 标签进行分离。由于其自身带有 GST 标签,Prescission Protease 能在单一步骤实现 GST 标签的柱上酶切和蛋白质纯化。此蛋白酶在低温条件下具有最佳活性,因此低温孵育不仅可以保证 GST 标签的高效去除,也能维持目标蛋白的活性。 Thrombin 和 Factor Xa 常温下具有较高的酶活,当选

    • 蛋白复性缓冲液的使用

      接上Ni柱,然后在柱上复性.丁香园网友wangcaixia1认为:我用的是pGEX-6p-1载体,我想问的是复性缓冲液可以重复利用吗?也就是可以用过一次后,再用来复性其他蛋白吗?丁香园网友panmo2006认为:完全可以啊,但是你不要忽视了使用后的复性液里面各种成分的浓度(如尿素、氧化型还原型谷胱甘肽的等)都要发生变化,那你下次再处理该蛋白时,你的条件怎么确定呢,就是说重复性很难把握。

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      X-3 pGEX-6P-1 pGEX-6P-2 pGEX-6P-3 五.PTYBsystem PTYB1 PTYB2 PTYB11 PTYB12 六.真核表达载体 pCDNA3.1(-) pCDNA3.1( ) pPICZalphaA pGAPZαA

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