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- 2025年07月12日
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鼎国
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文献和实验Transformation of HB-101 Competent Cells
实验步骤 1. Thaw tubes of competent cells on ice, occasionally inverting gently to mix. 2. Pre-cool Falcon 2059 tubes on ice. 3. Aliquot 30 ul cells into each tube. 4. Add up to 10 ul DNA in TE or ligation
观察到。 三．实验材料 受体菌：E.coli K12 HB101 质粒：pGLO plasmid 转化液（CaCl2） 氨苄青霉素（amp） 阿拉伯糖（ara） 培养基：固体LB、液体LB 接种环、移液器等 四．实验步骤 1. 准备平板： 每组：1块LB平板，2块LB/amp平板，1块LB/amp/ara平板 2. 准备感受态细胞：用250µl无菌水或转化液悬浮试剂盒中提供的大肠杆菌菌粉，此即感受态细胞
, 1ml 转至50 ml LB, 37oC 250 r/m至 A600=0.... 液氮或低温冰箱中取出的 大肠杆菌 *E.COLI DH5, JM109,HB101等,在LB平板上划线,37度过夜至长出单菌落.挑直径1-3毫米的单菌落*可多个, 接种到250毫升/3升锥形瓶 或80毫升/1升 锥形瓶 的SOC培养基. 培养基 量不可再多,会影响效率.在18度 150
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