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文献和实验均匀分布，放入37℃，5%CO2培养箱中培养，每隔24H观察细胞状态； 注意：该细胞对血清敏感，建议使用爱必信优级血清，劣质血清会导致细胞生长速度慢。 注意：一般3×10⁵~2×10⁶ cells/mL 的密度最为适宜。过稀会停止增殖甚至死亡，过密会很快凋亡。 三、细胞冻存 1.【准备工作】细胞冻存液可使用无血清细胞冻存液（abs9417-100mL），也可以自行配制：90%FBS（abs972-500mL）+10%DMSO（abs9187-100mL）。存管提前标注：细胞名称、代数、冻存人、冻存
9244-100ml/SV30010），取9mL完全培养基于37℃预热；安全柜紫外30min。 2.【融化】从液氮/冰箱取出冻存管，37℃水浴快速摇晃融化，约1-2min。 3.【重悬】75%酒精擦拭冻存管外壁，安全柜内开盖，将细胞悬液沿管壁缓慢滴入含9mL预热完全培养基的离心管，轻柔混匀（悬浮细胞勿吹打）。 4.【离心】300×g离心5-10min，弃上清，去除DMSO。 5.【重悬】加入完全培养基轻轻重悬（禁止吹打，避免机械损伤），接种T25瓶（4-6mL），轻摇混匀，标注信息。 6.【培养】放入
，约1-2min。 3.【重悬】75%酒精擦拭冻存管外壁，安全柜内开盖，将细胞悬液沿管壁缓慢滴入含9mL预热完全培养基的离心管中，轻柔混匀。 4.【离心】300×g离心5min，弃上清，减少DMSO残留。 5.【重悬】加入1-2mL完全培养基轻轻吹打重悬；接种T25培养瓶（4-6mL培养基），十字混匀，标注名称、代次、日期。 6.【培养】放入37℃、5%CO2培养箱；24-48h贴壁后换液去除死细胞碎片。 二、细胞传代 1.【实验准备】配制完全培养基：MEM改良Eagle培养基（abs9467
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