Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液(粉剂)蛋白免疫印迹（West

蛋白免疫印迹（Western Blot）技术手册

1．简介 Western Blot中文一般称为蛋白质印迹。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。 2．原理 Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳 ，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗

Western Blot(免疫印迹法)步骤

杂交膜的选择是决定 Western blot成败的重要环节。应根据杂交方案、被转 移蛋白的特性以及分子大小等因素，选择合适材质、孔径和规格的杂交膜。用于Western blot的膜主要有两种：硝酸纤维素膜(NC) 和 PVDF 膜。NC 膜是蛋白印迹实验的标准固相支持物，在低离子转移缓冲液的环境下，大多数带负电荷的蛋白质会与膜发生疏水作用而高亲和力的结合在一起， 但在非离子型的去污剂作用 下，结合的蛋白还可以被洗脱下来。根据被转移的蛋白分子量大小，选择不同孔 径的 NC 膜。因为随着膜孔径的不断

Western Blot 蛋白质印迹实验

WB 作为传统的实验技术，在实验室中得到了广泛的应用。 讲座从 WB 的基础原理、实验流程及常见问题和解决方法等方面对此项技术进行全面的介绍，结合具体实验案例，深入浅出的对 WB 技术进行解析，无论实验新手还是富有经验的操作者，都可以从讲座中获得所需的知识，用于获得更为完美的 WB 实验结果。