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文献和实验都可以保证无菌。如果试剂需要自己用干粉配制,那么在配制中需要严格按无菌操作进行。另外每次试剂配制量不宜过多,比如完全培养基建议以一到两周内用完为宜。试剂在分装时可以考虑再用针头式过滤器过滤一次,减少污染的可能性。如果所用移液器吸头是散装的,则注意在将吸头装入吸头盒时需要带手套,因为灭菌时无法完全去除吸头上可能粘附的油脂和其他杂质。 其次,安全柜每次使用前需要紫外照射30min灭菌,然后通风5min以上保证换气到位。每次处理细胞前应将实验需要的各种试剂、耗材备齐,尽量减少细胞处理过程中的来回
移液器吸取。 另外,SIGMA公司和其他公司的细胞培养专用DMSO,是经过除菌的,可以直接使用。 丁香园网友jjyyll的观点为:一般细胞培养的用液均需要无菌处理,DMSO或者无水乙醇或水溶解后加入培养的细胞用液更需要如此,不过DMSO是有机溶剂用一般的针头滤器就会将滤膜融解,如:要过滤DMSO溶解的DTZ,需要使用耐DMSO的Nylon材料滤膜(摘自生物谷)但如果是只作简单的验证或测量鉴定,也可以考虑不过滤而直接使用,因为不会大批量的细胞污染,相关资料也可以从生物谷中查找 4.33
. 如果有可以测量负压的仪器,也可以用两个空气阀先试试看,看在一个空气阀中的流量对另一个的影响。 7.针筒式滤器与膜的安装 丁香园网友cosmosci的观点为:小的针式过滤器(直径为25mm\33mm规格)在使用或检测的时候压力为75psi 相当于4.5KG的力大小,不要用力过大,不然容易让滤膜变形,在使用中就失去了效果;检测时用力均匀。
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