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引物合成服务,随机引物合成,PCR引物合成服务
上海信帆生物科技有限公司
/个碱基
1、服务特色
合成设备:进口Dr.Oligo-192系列合成仪 能力强大:通量达20万碱基/天纯化方式多样:脱盐(DSL)OPC、PAGE、F-PAGE及HPLC等四种纯化方式 产品质量优质:以LC-MS质谱仪及HPLC色谱仪检测为质控依托合成速度快捷:全面保证合成速度2、服务流程联系销售 → 签订合同 → 订单确认 → 引物合成 → 发货3、温馨提示
1.如未注明合成规模,我们将按普通引物2OD、page长链引物1OD的量合成,单管包装;修饰及标记引物将按相应长度的引物的量合成;
2.修饰或标记引物的价格计算方式是:总价=常规引物的价格+修饰或标记的价格;单条引物<10base(包括10base)的引物请询价;
3.简并引物按常规引物收费;
4.需要高OD值的引物请询价;
5.如果需要周六或周日送货,请与当地销售员联系。
Q1:引物如何溶解? 合成报告单中的Note给出了每OD引物稀释为100μM(即100pmol/ul)浓度的加水量,您可以根椐您的实验需要加入适量的无核酸酶的双蒸水(PH>8.0)或TE缓冲液(PH 7.5-8.0),开启瓶盖溶解之前好在3000-4000转/分钟的转速下离心1分钟,防止开盖时引物散失。 1.引物管上标有1OD 相当于多少nmol 的计算结果,进行稀释时的引物加水量可以按以下公式计算: 稀释成100μM (100pmol/ul) 1OD 需加水量(ul)=1OD相当于nmol 数×102.液体引物再稀释可用下列公式: 稀释引物要达到的浓度(pmol/ul)=母液浓度(pmol/ul)×汲取母液的体积(ul)÷[汲取母液的体积(ul)+加水量(ul)]
Q2:引物如何保存? 没有溶解的引物非常稳定,可以在-20℃下保存至少1年,溶解好的引物可以事先稀释为100μmoL/L的储存液,分装数管保存于-20℃冰箱,可以保存至少半年以上(反复多次冻融会降低使用寿命)。使用前,将浓溶液稀释成工作液后进行实验。
常用荧光染料参数:
染料
Excitation(激发波长,nm)
Emission(发射波长,nm)
颜色
6-FAM
494
518
Yellow-Green
Flurescein
495
520
TET
521
536
JOE
548
Yellow
HEX
533
559
CY3
550
570
Yellow-Orange
TAMRA
544
576
ROX
601
Orange
CY5
650
670
Red
用引物列表:
引物
序列
包装
Random Sexamer
5’d(NNN NNN)3’
1.0 OD
Random Nonamer
5’d(NNN NNN NNN)3’
Random Decamer
5’d(NNN NNN NNN N)3’
M13/pUC Sequencing Primer (-20)
5’d(GTA AAA CGA CGG CCA GT)3’
M13/pUC Sequencing Primer (-40)
5’d(GTT TTC CCA GTC ACG AC)3’
M13/pUC Sequencing Primer (-47)
5’d(CGC CAG GGT TTT CCC AGT CAC GAC)3’
M13/pUC Reverse Sequencing Primer
5’d(AAC AGC TAT GAC CAT G)3’
5’d(CAG GAA ACA GCT ATG AC)3’
M13/pUC Reverse Sequencing Primer (-48)
5’d(AGC GGA TAA CAA TTT CAC ACA GGA)3’
SP6 Promotor Primer
5’d(CAT ACG ATT TAG GTG ACA CTA TAG)3’
T7 Pomotor Primer
5’d(TAA TAC GAC TCA CTA TAG GGC GA)3’
T3 Promotor Primer
5’d(ATT AAC CCT CAC TAA AGG GA)3’
Oligo d(T)10
5’(TTT TTT TTT T)3’
Oligo d(T)12
5’(TTT TTT TTT TTT)3’
Oligo d(T)14
5’(TTT TTT TTT TTT TT)3’
Oligo d(T)16
5’(TTT TTT TTT TTT TTT T)3’
Oligo d(T)18
5’(TTT TTT TTT TTT TTT TTT)3’
Oligo d(A)18
5’d(AAA AAA AAA AAA AAA AAA)3’
Oligo d(C)18
5’d(CCC CCC CCC CCC CCC CCC)3’
Oligo d(G)18
5’d(GGG GGG GGG GGG GGG GGG)3’
Oligo d(T)9A
5’(TTT TTT TTTA)3’
Oligo d(T)11A
5’(TTT TTT TTT TTA)3’
Oligo d(T)13A
5’(TTT TTT TTT TTT TA)3’
Oligo d(T)15A
5’(TTT TTT TTT TTT TTTA)3’
Oligo d(T)17A
5’(TTT TTT TTT TTT TTT TTA)3’
Oligo d(T)9G
5’(TTT TTT TTTG)3’
Oligo d(T)11G
5’(TTT TTT TTT TTG)3’
Oligo d(T)13G
5’(TTT TTT TTT TTT TG)3’
Oligo d(T)15G
5’(TTT TTT TTT TTT TTTG)3’
Oligo d(T)17G
5’(TTT TTT TTT TTT TTT TTG)3’
Oligo d(T)9C
5’(TTT TTT TTTC)3’
Oligo d(T)11C
5’(TTT TTT TTT TTC)3’
Oligo d(T)13C
5’(TTT TTT TTT TTT TC)3’
Oligo d(T)15C
5’(TTT TTT TTT TTT TTTC)3
Oligo d(T)17C
5’(TTT TTT TTT TTT TTT TTC)3
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