FITC/PE rat anti-mouse CD4/CD8

流式课堂 | 易被忽略的 CD4、CD8 共表达细胞——胸腺淋巴细胞

做过流式实验的同学，对 CD4、CD8 这两个指标都不会陌生。检测 CD4+ T 细胞和 CD8+ T 细胞分型，是流式中最常见的实验之一。 通常，我们会先检测 CD3，来圈总T淋巴细胞，再分别用 CD4 抗体和 CD8 抗体，来区分 CD4+ T 淋巴细胞（辅助或调节性T细胞）和 CD8+ T 淋巴细胞（细胞毒性 T 细胞）。 新生小鼠脾脏细胞 上图为新生小鼠脾脏细胞进行的 CD3-PE、CD4-FITC、CD8-APC 三色流式实验结果。从图中可以看出，在新生小鼠脾脏中，绝大

流式课堂 | 流式实验对照设置之单阳对照

多色流式实验中，由于不同荧光素的发射波长的覆盖范围不同，可能产生重叠，对实验结果的数据分析造成一定干扰，我们通常会设置单阳管进行调节补偿。同时，单阳管还可以辅助我们调节通道电压，防止信号超出接收范围。 图示：常见荧光素的发射光谱 A. 如何设置单阳管 单阳管即单染管，是只添加一种荧光抗体的样本管。一般来说，实验 panel 有几种荧光，就需要设置几个单阳管。如：APC、PE、FITC 的三色 panel，需要设置三个单阳管。 B. 制备单阳管的要求 ①单阳管和全染管的样本类型、荧光素要保持

流式实验如何配色？

第一步、根据实验目的，选择目标 Marker。 通过阅读相关文献，了解您实验需要选择哪些 Marker，以及这些 Marker 之间的逻辑关系（圈门的父子关系，比如 T 细胞CD3 是「父」，而 CD4 或者 CD8 就是子」）。 这里列举了一些常见的细胞标志 Marker： 第二步、确认 Marker 的表达位置。 对于细胞质或者细胞核的 Marker，需要对细胞进行固定破膜/破核膜。在做胞质或胞核 Marker 染色实验操作时，需要先染细胞表面 Marker