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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态:
粉末/液体
- 保存条件:
-20℃至-80℃
- 克隆性:
见说明书
- 标记物:
未标记
- 适应物种:
Rattus norvegicus (Rat)
- 宿主:
Mouse小鼠,Human人,Rat大鼠、、、、、
- 应用范围:
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度:
500ug/ml
- 抗体英文名:
Monoclonal Antibody to Enolase, Neuron Specific (NSE)
- 抗体名:
神经元特异性烯醇化酶(NSE)单克隆抗体
- 规格:
200ug
www.klbscience.com
单克隆抗体制备的基本过程如下:
(1)用抗原免疫小鼠;
(2)从抗原免疫过的小鼠获取脾细胞;
(3)应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合,得到杂交瘤细胞。这种细胞不仅能够像B淋巴细胞一样合成性质稳定的转移性抗体,而且能够像骨髓瘤细胞一样无限复制,这样就可以产生大量且性质专一的鼠源抗体;
(4)对获得的杂交瘤细胞进行筛选,选出能分泌高效价抗体的杂交瘤;
(5)对已筛选出的单个细胞进行鉴定和克隆。
杂交瘤产生的单克隆抗体在各个领域中应用越来越广,有很大的优点和潜力。能够根据需要进行研发生产,可建立稳定的细胞株持续供给应用,相比于抗血清能够减少大量的动物和费用,而且纯度高,均一性好,可作为一种标准试剂。
在获得能分泌高效价抗体的杂交瘤细胞株后,一般有两种方法来获得单克隆抗体:小鼠腹腔注射杂交瘤细胞和细胞培养。
(1)小鼠腹水:
将杂交瘤细胞接种到小鼠的腹腔,杂交瘤在腹腔内增殖,取得腹水进行纯化即可得到抗体。此法易于操作,重复性高,且花费少,得到的抗体量多,但伤害动物,而且当需要大规模制备抗体时需要大量动物。
(2)细胞培养:
将杂交瘤细胞进行培养,培养后的上清液中即含有抗体。这种方法适合大规模生产抗体。但是这种方法获得的抗体杂质相对较多,因为细胞上清含有培养液,pH指示剂,细胞代谢废物等。而且培养用的血清中的成分不明确,可能会含有能影响抗体纯度的杂蛋白。所以在细胞培养中会逐渐将杂交瘤细胞通过逐步减少血清来驯化到无血清培养。
总之,单克隆抗体的高特异性,重复性使其在生物研究以及医药方向都有良好的应用基础以及前景。
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然而,要想得到一张高质量的免疫组化染色切片也并非易事。由于切片制作和免疫组化染色过程均存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都需要操作者严格控制实验条件,否则可能会影响到最终结果。
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文献和实验近年来,肺癌的肿瘤标志物(tumor marker,TM)研究十分活跃。肺癌常用的肿瘤标志物很多,根据美国NACB准则,这里主要介绍神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胃泌素释放肽前体 (ProGRP)、癌胚抗原(CEA)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)和鳞状细胞癌相关抗原(SCCA)等几种比较肯定的肿瘤标志物。 表1 国际上不同专家组对肺癌标志物应用的建议 1.神经元特异性烯醇化酶(neuron specific enol
15-3、CA19-9、PSA、SCC等),酶类(如神经元特异性烯醇化酶NSE、前列腺酸性磷酸酶PAP等),激素(hCG等),类固醇激素受体(如雌激素和孕酮受体等),单克隆免疫球蛋白和癌基因表达蛋白。
肿瘤标志物解读真的另外科大夫很头疼,又多又有交叉,一个标记物可在 N 多种癌中出现,1 种癌又可以有 N 种标记物,一会能提示,一会又是假阳性,等等问题...笔者通过一张表格帮大家梳理总结相关知识点,理清一下常用的肿瘤标记物。常见肿瘤标志物及意义癌胚抗原 ( CEA) 、甲胎蛋白 ( AFP) 及糖类抗原 ( CA19-9) 、鳞状细胞癌抗原 SCC/SCCA、NSE 神经元特异性烯醇化酶、细胞角蛋白 19 片段(cytokeratin fragment 19;CYFRA 21-1)、胃泌素
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