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- kl900Hu21
- 2025年07月08日
- WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- Mouse小鼠，Human人，Rat大鼠、、、、、
- Homo sapiens (Hukl)
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态：
粉末/液体
- 保存条件：
-20℃至-80℃
- 克隆性：
见说明书
- 标记物：
未标记
- 适应物种：
Homo sapiens (Hukl)
- 宿主：
Mouse小鼠，Human人，Rat大鼠、、、、、
- 应用范围：
WB, ICC, IHC-P, IHC-F, ELISA
- 浓度：
500ug/ml
- 抗体英文名：
Monoclonal Antibody to Sclerostin Domain Containing Protein 1 (SOSTDC1)
- 抗体名：
含硬化蛋白域蛋白1(SOSTDC1)单克隆抗体
- 规格：
200ug
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单克隆抗体制备的基本过程如下：
（1）用抗原免疫小鼠；
（2）从抗原免疫过的小鼠获取脾细胞；
（3）应用细胞杂交技术使骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，得到杂交瘤细胞。这种细胞不仅能够像B淋巴细胞一样合成性质稳定的转移性抗体，而且能够像骨髓瘤细胞一样无限复制，这样就可以产生大量且性质专一的鼠源抗体；
（4）对获得的杂交瘤细胞进行筛选，选出能分泌高效价抗体的杂交瘤；
（5）对已筛选出的单个细胞进行鉴定和克隆。
杂交瘤产生的单克隆抗体在各个领域中应用越来越广，有很大的优点和潜力。能够根据需要进行研发生产，可建立稳定的细胞株持续供给应用，相比于抗血清能够减少大量的动物和费用，而且纯度高，均一性好，可作为一种标准试剂。
在获得能分泌高效价抗体的杂交瘤细胞株后，一般有两种方法来获得单克隆抗体：小鼠腹腔注射杂交瘤细胞和细胞培养。
（1）小鼠腹水：
将杂交瘤细胞接种到小鼠的腹腔，杂交瘤在腹腔内增殖，取得腹水进行纯化即可得到抗体。此法易于操作，重复性高，且花费少，得到的抗体量多，但伤害动物，而且当需要大规模制备抗体时需要大量动物。
（2）细胞培养：
将杂交瘤细胞进行培养，培养后的上清液中即含有抗体。这种方法适合大规模生产抗体。但是这种方法获得的抗体杂质相对较多，因为细胞上清含有培养液，pH指示剂，细胞代谢废物等。而且培养用的血清中的成分不明确，可能会含有能影响抗体纯度的杂蛋白。所以在细胞培养中会逐渐将杂交瘤细胞通过逐步减少血清来驯化到无血清培养。
总之，单克隆抗体的高特异性，重复性使其在生物研究以及医药方向都有良好的应用基础以及前景。
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然而，要想得到一张高质量的免疫组化染色切片也并非易事。由于切片制作和免疫组化染色过程均存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都需要操作者严格控制实验条件，否则可能会影响到最终结果。
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文献和实验的细胞群所产生的，所以它的免疫球蛋白属同一类型，质地纯一，而且它是针对某一抗原决定簇的，因此特异性强，亲合性也一致。单克隆抗体（McAb）的特性和常规血清抗体的特性比较见2-3。 表2-3 单克隆抗体（McAb）和常规免疫血清抗体的特性比较 单克隆抗体的制备方法如下。 （一）动物的选择与免疫 1．动物的选择 纯种BALB/C小鼠，较温顺，离窝的活动范围小，体弱，食量及排污较小，一般环境洁净的实验室均能饲养成活。目前开展杂交瘤技术的实验室多选用纯种BALA
特异染色的程度。 （6）标记抗体的保存：宜保存于4℃，加NaN3防腐。 2、异硫氰酸罗丹明（TRITC）标记： 基本与FITC标记相同。 三、同位素标记 必须强调的是在使用同位素标记单抗或其他蛋白之前，应掌握同位素操作和防护知识。正常情况下应包括避免物理的接触和对γ-射线照射的有效保护，操作和使用同位素标记抗体时，应利用防护装置，并合理处置含放射性的废料。 1、碘标记 用碘标记抗体是一种有效的标记方法。125I衰变产生低能的γ和Χ射线，很容易被检测出来，而其60天的半衰期保证足够的有效使用
浓度很高。可见该法操作简便、经济，不过，腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白（包括Ig），因此在很多情况下要提纯后才能使用，而且还有污染动物病毒的危险，故而最好用SPF级小鼠。（1）材料：a. 成年BALB/c小鼠。b. 降植烷（Pristane）或液体石蜡。c. 处于对数生长期的杂交瘤细胞。（2）方法：a. 腹腔接种降植烷或液体石蜡，每只小鼠0.3-0.5ml。b. 7-10天后腹腔接种用PBS或无血清培养基稀释的杂交瘤细胞，每只小鼠5×105/0.2ml。c. 间隔5天后，每天观察小鼠腹水产生情况，如腹部
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