- 询价
- 2025年07月13日
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 询价记录
- 技术资料
质粒
质粒(plasmid)是一种寄于宿主细胞中独立于染色体外裸露的小型双链环状DNA 分子，一个质粒就是一个DNA分子，质粒广泛存在于多种细菌的细胞中，在某些蓝藻、真菌和绿藻的细胞中也发现含有质粒。在宿主细胞内，质粒一般以共价闭环DNA分子(cccDNA)的形式存在，体外在理化因子作用下，质粒可以成为开环DNA分子(ocDNA)和线形DNA分子(lDNA)。在变性条件下，质粒可以成为单链DNA分子(ssDNA)。在眼虫、衣藻等极少数真核生物的细胞中发现了线形质粒DNA分子。在自然界还发现了RNA质粒，如酵母的杀伤质粒(killerplasmid)。质粒DNA分子小和不足2kb，大的可达100kb以上，多数在10kb 左右。
质粒的生物学特性
1、质粒是细菌染色体外能自主复制的环形双链DNA分子。质粒DNA可以持续稳定地处于游离状态，但一定条件下又会可逆地整合到寄主染色体上，随染色体复制而复制。
2、编码抗菌素抗性基因的质粒叫R质粒。质粒DNA在添加真核复制信号和启动子后，可以构建出能在原核和真核细胞中均可复制的穿梭质粒，并在真核细胞中表达，因此应用广泛。
3、根据每个寄主细胞中质粒拷贝数的多少，把质粒分为严紧型复制质粒（拷贝数少，为1-5个）与松弛型复制质粒（拷贝数多，可达10-200个拷贝）。因此，作为载体的质粒应该是松弛型的。
4、质粒的不亲和性：两种亲缘关系密切的不同质粒，不能够在同一个寄主细胞系中稳定地共存的现象。
质粒载体人工构建的目的
天然存在的野生型质粒由于分子量大、拷贝数低、单一酶切位点少、遗传标记不理想等缺陷，因而不适合用作基因工程的载体，必须对之进行改造构建：
1、加入合适的选择标记基因，如两个以上，易于用作选择。
2、增加或减少合适的酶切位点，便于重组。
3、缩短长度，切去不必要的片段，提高导入效率，增加装载量。
4、改变复制子，变严紧为松弛，变少拷贝为多拷贝。
5、根据基因工程的特殊要求加装特殊的基因元件。
理想的质粒载体应具备的条件
1、分子量较小。
2、松驰型，在受体细胞中有较多的拷贝数。
3、具有一个以上的选择标记基因，形成重组质粒后，至少还要有一个强的选择标记。
4、具有允许外源DNA片段克隆的位点，并且位于选择标记基因区内，插入外源片段不影响质粒的复制功能。
5、能够导入寄主细胞，具备转化的功能。
6、操作简单方便，可根据需要加装其它元件，构建不同用途的质粒载体。
构建质粒载体应遵循的原则
1、选用合适的出发质粒。
2、正确获得构建质粒克隆载体的元件。
3、根据要转化的受体细胞的特性，组装合适的选择标记基因。
4、构建质粒表达载体，选用合适的启动子。
5、力求构建过程简单化。
常用大肠杆菌质粒载体
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
- 作者
- 内容
- 询问日期
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
质粒载体构建
询价
