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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
钰博生物
- 细胞类型:
复苏
- ATCC Number:
详见官方网站
- 组织来源:
见说明书
- 物种来源:
人、大鼠、小鼠、、、、
- 免疫类型:
请咨询销售人员
- 细胞形态:
上皮样;多角形
- 是否是肿瘤细胞:
见说明书
- 器官来源:
见说明书
- 运输方式:
干冰运输or活细胞运输
- 年限:
见说明书
- 生长状态:
贴壁生长
- 规格:
1ml/株
规格:1×106 5×106
含量:>1x106 个/mL
运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)HB (Balb/c X NS1/1) JT4C16细胞,ATCC细胞存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途:仅供科研使用。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. HB (Balb/c X NS1/1) JT4C16细胞,ATCC细胞所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
(1)接种后60-80分钟,换液去除悬浮细胞
(2)原代培养24h,48h各换液一次
(3)HB (Balb/c X NS1/1) JT4C16细胞,ATCC细胞观察细胞情况,在原代培养7天左右时,如观察到成片的典型形态的细胞,在瓶底用Marker笔标记,0.25%胰酶消化,镜下观察控制,约5-10分钟(室温太低时应放置到孵箱中),加入全培养基终止消化,瓶体朝上,吸管轻轻吹打4-8分钟,尤其是标记部位。不要用力吹打,以免把贴壁较牢的成纤维细胞,上皮样细胞吹打下来
(4)传代到新瓶中,加入少量培养基,孵箱静置20-30分钟后,MSC大多牢固贴壁。瓶底朝上,轻轻吹打,丢弃悬浮以及贴壁不牢的细胞(大多是上皮样细胞),加入全培养基开始传代培养,如观察仍有较多杂细胞,可重复上述步骤。
(5)经上述处理后,原代的那瓶细胞仍有一些MSC生长,可继续按原代培养,如观察到MSC的克隆,仍可按上述步骤纯化处理。
(6)原代或传代的细胞如观察的少量成片的杂细胞,可直接镜下瓶底标记后,超净台里用长吸管尖端机械刮除,吸出去掉。
HB (Balb/c X NS1/1) JT4C16细胞,ATCC细胞目前临床上开展的关于干细胞的治疗项目多基于间充质干细胞,其中最常见的是骨髓干细胞。骨髓干细胞包含多种干细胞亚型,如造血干细胞、间充质干细胞、内皮祖细胞等。造血干细胞治疗血液系统疾病如白血病、淋巴瘤比较成熟,各个医院已经比较成熟。而骨髓间充质干细胞或笼统的骨髓干细胞在治疗其它系统疾病方面也有一些报道,如急性心肌梗死、糖尿病足等。目前这些治疗样本量少,缺乏随机对照试验,确切的疗效尚有待进一步验证。
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文献和实验培养 Hela细胞(ATCC)接种在合适的含附加成分的细胞培养基中,并在37℃,5%CO2 湿润环境下培养。细胞用胰蛋白酶消化、清洗并接种在E-Plate VIEW 96上。 转染 接种24小时后,分别用三种转染试剂X-tremeGENE 9、X-tremeGENE HP以及其他试剂(LTX和L2K),转染CMV启动子的GFP-pcDNA3.1质粒。转染根据指导手册说明,采用各说明书建议的最适DNA与转染试剂比例。所有实验重复三次。 实时细胞分析
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-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP Transfection Reagent在Hela细胞系的检测实验上,表现出低细胞毒性和高DNA转染效率。xCELLigence RTCA MP也是理想的适合实时检测试剂特异性效应的仪器。 材料和方法 细胞培养 Hela细胞(ATCC)接种在合适的含附加成分的细胞培养基中,并在37℃,5%CO2 湿润环境下培养。细胞用胰蛋白酶消化、清洗并接种在E-Plate VIEW 96上。 转染 接种24小时后,分别用三种转染
°C )中进行。细胞培养基为生长培养基,细胞接种密度是 1-2 x 104 细胞每孔,接种于96孔E-Plates 中,并通过xCELLigence 系统进行过夜监测,直至细胞生长至接近满板,复孔检测。预先在另一普通96孔板中每孔中添加 2 µl 药物,并储存于 -20℃。待细胞培养 18-24 小时后,进行药物稀释反应。将药物融解,并添加 132 µl 检测缓冲液(1 x HBSS,Sigma H8264、20mM HEPES,Cellgro 25-060-Cl、0.1% BSA,Fisher
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