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这种液体胰蛋白酶配方内含 EDTA 和酚红。Gibco 胰蛋白酶-EDTA 由胰蛋白酶粉(来自猪胰腺的蛋白酶辐照混合物)制成。鉴于其消化强度,胰蛋白酶被广泛用于细胞解离、常规细胞培养传代以及初生组织解离。
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文献和实验胰酶 pancreatin 为从牛和猪的胰脏中提取的粗酶的总称,其中含有胰蛋白酶( Trypsin)、脂肪酶( lipase)、淀粉酶( amylase)、麦芽糖酶( maltase)和核酸酶( nuclease)等。
olivial 最近想用western blot检测小胶质细胞活化后细胞内p-Akt表达情况(包括时间点),那么提蛋白时可否用胰酶消化的方法?加药前是否要将完全培养液换成无血清培养液? ylhuang0502 Q1. 提蛋白时可否的方法? A1.: 不要用胰酶消化, 贴壁细胞处理后,立刻至于冰上,用PBS洗三次后,直接加lysis buffer裂解提蛋白,lysis buffer的组分可查查文献,或在本版搜一下。
一、原理与目的 提取制备酶的经典方法,多采用硫酸铵分级沉淀,胰酶在75%饱和度硫酸铵中沉淀,其它杂蛋白一般在10%硫酸铵饱和度下被沉淀而除去。经此多次提取,最后在PH8.0硼酸缓冲液中得到结晶。 胰酶在PH3.0时最稳定,可在低温下储存较长的时间而不失活;低与此PH酶易变性;高于PH5时,酶易自溶而失活。因此提取制备胰酶的全部操作过程应在低温和低PH下进行。胰酶以无活性的酶原形式存在于动物的胰脏中。胰蛋白酶原在正常生理条件下可被肠激酶和钙离子所激活或自我环化成为有活性的酶。猪
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