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- 见说明书
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- KL-E12544
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 供应商：
康朗生物
- 检测范围：
见说明书
- 检测方法：
酶联免疫
- 应用：
科研
- 标记物：
见说明书
- 样本：
血清/组织/尿液
- 规格：
96T/48T
英文学名：Rat Anaphylatoxin / complement fragment 4a (C4a) ELISA kit
科研名称：大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒说明书
实验名称：大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)检测试剂盒
大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒问：间接法检测抗体，大体过程如下：
包被（4度过夜），PBST洗涤，封闭(5%脱脂奶粉)，洗涤，加入一抗，洗涤，加入二抗，洗涤，我设置的阴性对照就是第一步直接在孔中加100ul 包被液，没有加我的蛋白，照理说，没有蛋白最后就不应该显色，怀疑是二抗没洗涤干净所以才显色，洗涤了至少5次以上，最后还在纸上使劲拍干，但是最后还是显色，求高人指点~~（包被液是碳酸盐缓冲液，稀释液assay buffer: PBS：KH2PO4,Na2HPO4.12H2O,NaCL,KCL,Tween-20，我的一抗二抗都是用这个稀释液配的，封闭液也是用稀释液配的脱脂奶粉，没有血清啊）
大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒答：
1.可能封闭效果不好
2可能封闭液脱脂奶粉可以和一抗交叉反应
3.一抗没有洗涤干净
4.加样时操作出现错误。
大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒先确定封闭有没有问题，洗的话二抗确实多洗几遍没错，没有洗板机，每次洗可以摇晃板子，每遍1-2分钟，也可以多设置几个阴性孔，观察结果，看是不是没洗干净的问题。加样尽量加到底部，避免沾壁！
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文献和实验补体成分 C4(C4a/C4b) 补体成分：C4 血清浓度(μg/ml)：200～500 分子量(kDa)：210 亚单位(链)及分子量(kDa)：α：90β：78γ：33 激活产物：C4a；C4b 生物学活性：C4a 弱的过敏毒素作用 C4b 组成CP中的C3、C5转化
Array上那8300个基因对应的80碱基长寡核苷酸序列是经过Clontech公司专利软件在GenBank中筛选出的同源性最低，又经Clontech实验确保能给出很强杂交信号的片断。这种精巧的设计保证很高的分辨率、灵敏度，实在令人印象深刻。现在，你可以通过基因公司定购这些寡核苷酸来制作自己的芯片了。足够点1000次芯片的8327个人类基因、5002个小鼠基因或者将近4000个大鼠基因的寡核苷酸片断（冻干）放在96孔板中，连同100个Type II玻片和杂交盒，200ml杂交液，全面满足中小型实验项目
小鼠，32d后将小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞P3 X63.Ag8.653融合，细胞融合悬液于96孔板上培养生长杂交瘤细胞集落，用整个Hp作靶细胞的间接ELISA法筛选抗体，共获得21株阳性单克隆抗体，其中以CB-26为最好。 研究证明单克隆抗体CB-26具有很强的特异性，它不与人红细胞、粒细胞、胃窦腺细胞和胃小凹细胞起反应，也不与非弯曲菌属的Gram阴性菌、甚至空肠、结肠和胎儿弯曲菌起反应。作者等还对60名经内镜检查的病人鉴定 了单克隆抗体CB-26辨认胃粘膜刷片中Hp的能力。用间接
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