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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
100 µg
蛋白名称:SPF30蛋白, SPF30 protein
蛋白构建:A DNA sequence encoding the mature form of human SMNDC1 (O75940) (Met1-Gln238) was expressed with a polyhistide tag at the N-terminus.
表达宿主:E. coli
蛋白纯度:> 85 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性:0
蛋白内毒素:Please contact us for more information.
预测N端:His
蛋白分子量:The recombinant human SMNDC1 consists of 253 amino acids and predicts a molecular mass of 28.5 KDa. It migrates as an approximately 29 KDa band in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:O75940
蛋白氨基酸序列:Met1-Gln238
蛋白标签:N-His
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验。当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。使用His-tag有下面优点:1.标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解
)利于纯化。组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组 蛋白进行分离纯化。使用His-tag有下面优点: 标签的分子 量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能; His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析 去除杂蛋白,使复性不受其它蛋白
1. 取保存的重组大肠杆菌菌液 150 微升接种于 30 毫升含相应抗生素的 LB 培养液中,在 100 毫升锥形瓶中,300rpm,37℃ 通气过夜培养。2. 取 16 毫升过夜培养物接种于 800 ml 含相应抗生素的 LB 培养液,在 2L 的锥形瓶中用预实验所确定的最佳诱导温度,300rpm,通气培养 4 小时,至对数生长中期。3. 以预实验确定的最佳 IPTG 浓度,最佳时间和最佳温度诱导表达靶蛋白。4. 收集菌液,4℃,5000 g(5500rpm)离心 15 分钟收集沉淀,-70℃ 保存
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