SDS-PAGE蛋白质中分子量

SDS-PAGE测定蛋白质分子量及蛋白质的纯度鉴定

一、实验目的与原理蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时，它的迁移取决于它所带电荷以及分子大小和形状等因素。1967年Shapiro等人发现，如果在聚丙烯酰胺系统中加入阴离子去污剂十二烷基磺酸钠（SDS），大多数蛋白质能与SDS按一定比例结合，即每克蛋白质结合1.4g的SDS－复合物都带上相同密度的负电荷，它的量大大超过了蛋白质分子原有的电荷量，因而消除了蛋白质原有的电荷差别，使蛋白质分子电泳的迁移率主要取决于本身的分子量，而与蛋白质所带的电荷无关，在一定条件下，蛋白质的分子量的对数与电泳迁移率间呈

SDS-PAGE蛋白质电泳常见问题分析

SDS-PAGE电泳主要利用聚丙烯酰胺 的分子筛效应分离蛋白质和核酸，SDS-PAG蛋白质电泳分析可从蛋白质亚基分子量的大小就分离蛋白质。 几乎所有蛋白质电泳分析都在聚丙烯酰胺凝胶上进行，而所有条件总要确保蛋白质解离成单个多肽亚基并进可能减少其相互间的聚集，最常用的就是SDS-Page 电泳技术，关于大家在此过程中经常遇到的问题进行一些讨论： Q：SDS-PAGE电泳 的基本原理? A：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS(十二

葡聚糖凝胶过滤法测定蛋白质分子量方法

。 对于脱盐的柱一般都是短而粗，柱长(L)/直径(D) (3)装柱要均匀，不要过松也不要过紧，最好也在要求的操作压下装柱，流速不宜过快，避免因此而压紧凝胶。但也不要过慢，使柱装得太松，导致层析过程中，凝胶床高度下降。 (4)始终保持柱内液面高于凝胶表面，否则水分挥发，凝胶变干。 (5)用此方法测蛋白质的相对分子量，受蛋白质形状的影响，并且测得的结果可能是聚合体的相对分子量，因而还需用电泳等方法进一步验证相对分子量测定结果。