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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
远慕生物
- 检测范围:
科研实验
- 检测方法:
双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)
- 样本:
血液、尿,粪便,脑脊液,胸腹水,前列腺液,精液,阴道分泌物等
- 规格:
96T/48T
人毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒说明书
上海远慕生物长期提供:ELISA试剂盒、免疫组化试剂盒、抗体、抗原、标准品等,价格实惠,质量有保证,信誉第一,竭诚欢迎新老客户咨询洽谈业务!
Human toxic shock syndrome toxin,TSST-1 ELISA Kit
产品货号:YM-KJ1532
规格:96T/48T
欢迎来电咨询订购:Elisa试剂盒,人毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA检测试剂盒
【实验准备】:
1. ELISA试剂盒及待测样本
2. 酶标仪(450nm波长滤光片)
3. 高精度移液器,EP管及一次性吸头
4. 37℃恒温箱,双蒸水或去离子水
5. 吸水纸
【标本要求】:
1. 血清:
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
2. 血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
3. 尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4. 细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
5. 培养细胞:
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
6. 组织标本:
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 .
8.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
【操作步骤】:
标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,依次进行稀释数倍。
加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
配液:将30倍(48T 的20 倍)浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
温育:操作同3。
洗涤:操作同5。
显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
【计算结果】:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
人毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒 试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:
0.2IU/L - 6IU/L
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文献和实验。 6.毒性休克综合征毒素-1(toxicshocksyndrometoxin1,TSST-1):抑制内毒素脱毒;刺激单核吞噬细胞释放血管活性物质。 7.葡萄球菌表面蛋白A(staphylococcalproteinA,SPA):可与IgG抗体Fc段非特异性结合,竞争性抑制吞噬细胞对细菌的吞噬作用。
肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的致病菌,全称肉毒梭状杆菌,在罐头食品及密封腌渍食物中具有极强的生存能力。它在繁殖过程中所分泌的毒素具有极强的毒性,是KCN毒性的一万倍,是毒性最强的毒素之一。纯化结晶的肉毒杆菌毒素 1 mg 能杀死 2 亿只小鼠,对人的半致死量为 40 IU/kg。肉毒杆菌毒素(Botulinum Toxin)前体是在肉毒杆菌细胞内产生的无毒化合物,肉毒杆菌死亡后无毒化合物释放出来,经肠道中的胰蛋白酶或细菌产生的蛋白酶激活后方始具有毒性。 肉毒杆菌毒素作用的机理是阻断神经
关键词: 鼠抗内毒素单链噬菌体抗体 制备 近几十年来,G-菌的感染一直是困扰临床的一个主要难题。以前统计,美国每年有约40万的脓毒症患者,并发休克患者的死亡率高于50%。内毒素(LPS)作为G-菌的毒性成分,在启动体内免疫系统反应、介导炎性介质因子的释放、导致脓毒症和中毒性休克中起着重要的作用。因此我们旨在制备出一株对内毒素具有较高亲和力的单链抗体。首先用内毒素腹腔注射免疫雌性BALB/c小鼠共4周,从小鼠脾脏中提取总RNA,然后反转录合成cDNA第一链。利用RT
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