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- 详细信息
- 用户评价
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
10ml
产品名称：
SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(5X)
产品概述：
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液，是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，5倍浓缩的蛋白上样缓冲液，
可用于常规的SDS-PAGE蛋白样品的上样。
保存条件 ：
-20℃保存，本试剂盒自订购之日起一年内有效。
注意事项：
1. SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（5X）中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙 醇。
2. SDS-PAGE蛋白上样缓冲液（5X）必须完全溶解后再使用。
3. 在4℃放置会有析出，使用前在37℃的水浴中溶解。
该产品被引用文献（仅展示部分）：
Zhong D; Zhang H J; Jiang Y D, et al., Saikosaponin-d: A potential chemotherapeutics in castration resistant prostate cancer by suppressing cancer metastases and cancer stem cell phenotypes. Biochem Biophys Res Commun 2016, 474 (4), 722-729.
PubMed: 27155154
操作流程：
1. 在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE上样缓冲液（5X）。水浴溶解后立即室温存放， 尽量避免长时间置于水浴中。
2. 按照每4µl蛋白样品加入1µl蛋白上样缓冲液（5X）的比例，混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液 （5X）。
3. 沸水浴加热3-5min，以充分变性蛋白。
4. 冷却到室温后，直接上样到SDS-PAGE胶加样孔内即可。
5. 通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。
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文献和实验PubMed: 27155154
1. 配胶缓冲液系统对电泳的影响? 在SDS-PAGE不连续电泳中，制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统，浓缩胶是pH6.7，分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中，其pH环境呈弱酸性，因此甘氨酸解离很少，其在电场的作用下，泳动效率低;而CL离子却很高，两者之间形成导电性较低的区带，蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比，这一区带便形成了较高的电压剃度，压着蛋白质分子聚集到一起
一、材料与仪器30%丙烯酰胺溶液；1.5mol/L Tris-HCl分离胶缓冲液，PH8.8；1.0mol/L Tris-HCl浓缩胶缓冲液，PH6.8；电泳缓冲液，PH8.3；10%SDS溶液；10%过硫酸铵溶液；样品处理液；染色液；脱色液；电泳玻璃板，电泳电源架，电泳槽，电泳仪等；蛋白Mark。二、方法与步骤1) 分离胶和浓缩胶配制按下表比例分别配制分离胶和浓缩胶：2)凝胶板的准备a) 洗板：将洗洁精用温水稀释后，用它浸透海绵擦洗二块玻璃板，然后用自来水洗净，再用酒精将板擦干。b)配板
孔径，如低浓度的聚丙烯酰胺孔径大，易分离较大蛋白，反之则反。而且蛋白越大，其在凝胶中迁移所需时间越长。二、电泳结合 SDS-PAGE 原理，加样前蛋白样品会先加热→蛋白去折叠。电泳槽中含有缓冲液，使得电流通过凝胶传导。加入蛋白样品和 Marker 后进行电泳。放置电极时注意将负电极置于顶部而正电极置于底部。顺带说下，Marker 中的标准蛋白（由多种已知分子量大蛋白组成）可对照形成蛋白阶带→测量凝胶电泳后蛋白的分子量。且一般买回来的 Marker 会对标准蛋白进行预染色以提高其可见度→监测跑蛋白的进展。三
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