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文献和实验Fast and reliable mini-prep RNA extraction from Neurospora crassa
containing high levels of nucleases. Extraction from starved cultures or plate mycelia with the LiCl method (Chambers and Russo, Fungal Genet. Newsl. 1987. 33:22-24) gave completely degraded RNA as judged by gel electrophoresis. In trying to improve
的 ULTRAhyb-Oligo 缓冲液(17x 缓冲液)。使用前需在 68℃ 环境中进行溶解。 ( 7 ) 用 0.5 U T4 多核苷酸激酶(PNK,Roche) 和 6 μl [γ-32P ] ATP ( 5000 Ci/mmol ) 标记 1 μmol/L DNA 寡核苷酸(约含有 10 个与目的基因互补的 DNA 寡核苷酸)。 ( 8 ) 参照 Hamilton 和 Baulcombe 的方法,在 35°C 条件下进行 RNA 印迹杂交[14]。 3. 注释 注
to perform DNase I digestion. 6. Add 3.5 ml RNA Wash Buffer I, close the tube gently. Centrifuge at?4,000 x g for 2 minutes. Discard both flow-through liquid and collection tube. 7. Place column in a clean 15 ml collection tube (Not supplied
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