细胞工程——实验服务

细胞培养、传代及冻存

实验内容

对组织样品或细胞株进行培养、传代和冷冻保存，主要包括
a) 原代细胞的培养和建系；
b) 正常细胞、肿瘤细胞、脐带血干细胞的培养传代；
c) 普通肿瘤细胞的小规模培养；

实验材料

需提供新鲜的组织样品或细胞株.

实验器材

二氧化碳培养箱(型号:Thermo 6500)

实验时间

15--30个工作日

实验说明

a) 细胞传代，得到传代3次的细胞株，并传代过程中细胞生长状况的相片，传代记录等；

b) 小规模培养，得到细胞干重≥2g的细胞

细胞转染

实验内容

将外源基因（质粒或基因组）用电转法或者脂质体介导法转入动物细胞中，用抗药性筛选标记，找出阳性转化子，传代培养；根据目的蛋白的特性，用ELISA、Western Blot、流式细胞仪检测等方法筛选目的蛋白产物表达量高的细胞株。转染方法一般采用电转法或者脂质体介导法。

实验材料

需要提供转入质粒或基因以及转入受体细胞株。

实验器材

电穿孔仪(型号:Gene Pulser II)

实验时间

50个工作日以上

实验说明

得到阳性转化子（细胞株）和相关实验记录

细胞检测

实验内容

利用流式细胞仪进行细胞的DNA含量的检测、对细胞凋亡及相关分子的检测、细胞周期分析、细胞凋亡分析、凋亡相关蛋白分析、线粒体膜电位检测、细胞ca²⁺浓度检测等； 对特定特征的细胞进行快速分选.

实验材料

需要提供组织样品或细胞样品、细胞株和相应的抗体。样品需处理成单细胞悬液，并用300目的滤网过滤；细胞样本体积需≥300～500μl，细胞样本浓度应≥10⁶/ml；

实验器材

流式细胞仪（型号:美天旎MACSQuant）

实验时间

1个工作日

实验说明

得到相关实验分析数据如直方图、散点图、密度图、三维图等.