大鼠 MMP-9 ELISA试剂盒

上海信帆生物是的ELISA试剂盒供应商，售的试剂盒受到广大科研用户的一致好评，并且发表了多篇文献，主要销售指标有白介素系列、趋化因子、生长因子、抑制因子、炎症因子、营养因子、脂肪因子类等。全程提供技术指导，提供售后服务和免费代测。欢迎来电咨询，索要说明书。

ELISA试剂盒自备材料：
1. 酶标仪。
2. 自动或者手工洗板机。
3. 恒温箱。
4. 可调节移液器及吸头，一次检测样品较多时，好用多通道移液器。
5. 干净的试管和Eppendof管。

ELISA试剂盒操作步骤：
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照图表在小试管中进行稀 释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl， 然后再加待测样品 10µl（样品终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽 量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
4.配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5 次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。
7.温育：操作同 3。
8.洗涤：操作同 5。
9.显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10.终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

ELISA试剂盒标准曲线的绘制注意事项：
1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的，所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事，否则后面的实验结果无从谈起。
2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。而对于呈S型的标准曲线，尽量要使实验样品的浓度在中间坡度陡段，即曲线几乎成直线的范围内。
3、好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，ELISA试剂盒这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。
4、检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。
5、标准曲线的样品数一般为7个点，但至少要保证有5个点。
6、做出的标准曲线相关系数因实验要求不同而有所变动，但一般来说，相关系数R至少要大于0.98，对于有些实验，至少要0.99甚至是0.999.

上海信帆是的ELISA试剂盒销售供应商，有专门的技术部门，全程提供技术指导和免费代测服务，提供售后服务，欢迎来电咨询。
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