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- 2025年07月16日
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文献和实验相关专题 NBS溴化试剂与溴化反应 分子 式：C4H4BrNO2 分子 量：178.00 CAS号：128-08-5 N-溴代琥珀酰亚胺;溴丁二酰亚胺;N-溴代丁二酰亚胺;N-Bromosuccinimide;Succinbromimide;1-Bromo-2,5-phrrolidinedione;NBS 性质：白色至乳白色细粒结晶，微有溴气味。密度2.098g/cm3，熔点180
。加入甘氨酸可以消除甲醛使交联反应终止。1.1.准备两个长满细胞的150cm2的细胞培养皿（1*107-5*107 个细胞/皿）。将甲醛直接滴入PBS洗过的细胞培养皿中，使其终浓度为0.75%，然后在室温缓慢旋转10分钟，使蛋白和DNA发生交联。1.2 加入甘氨酸使其终浓度为125mM,在室温晃动孵育5分钟。1.3 使用10ml预冷PBS清洗细胞2次1.4 使用细胞刮将细胞收获放入 5ml 预冷PBS中，并转入50ml的管子。1.5.在皿里加入3mlPBS，将剩余的细胞转移到50ml管子里1000g
抗体，荧光标记二抗，乙醇丙酮混合液（1：1）二、实验器械1、培养皿2、培养瓶3、直剪和眼科剪4、眼科镊5、玻璃滴管6、15ml离心管7、200目网筛三、实验流程取材↓取皮片，削成厚度为0.5mm的皮片↓皮片浸泡在75%酒精中消毒↓1 × PBS （pH 7.4 ）清洗皮片两遍↓皮片剪成（3-5）mm×（10-15）mm大小↓置于消化液中4℃消化过夜↓剥去表皮，并刮去真皮下的其他组织↓将组织块剪成1mm3 左右↓加入消化液，37℃消化至消化液浑浊↓停止消化，悬液过200目网筛↓收集细胞悬液，800
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