原核表达质粒pET 40b,

【共享】PET重组质粒转化表达质粒中遇到的问题

晚上每天都有人做报告，我觉得让我收获最大的是Bill Studier的报告。本来这个报告是后来才听到的，但是由于Burgess的模块是唯一的涉及大肠杆菌中表达蛋白的，我把这一段提前来说说。Studier这老哥是Brookhaven National Laboratory的，一生研究T7噬菌体，也是T7 RNA polymerase induction system（pET系列质粒）的发明者。 T7系统在大肠杆菌表达蛋白的应用实在太广泛了，但凡表达蛋白的兄弟姐妹们的不可能不知道这个系统

【专题讨论】原核表达秘笈之宿主菌株的选择！（接原原核表达研究者关心的10个问题贴）

在原核蛋白表达过程中，选择构建一个合适原核表达体系需要综合考虑3大因素：表达载体、宿主菌株、表达诱导条件,以获得最满意的表达效果。事实上，在平时的实验中，最容易被忽视的就是宿主菌的选择——多数人会直接选择自己实验室曾经用过的表达菌株，或者是载体配套的菌株，而不去追究原因——即使表达结果不佳，大多在表达条件和载体上找原因，也不会考究菌株的选择是否适合。 作为原核表达的宿主，对外源基因的表达会产生一定的影响，是勿庸置疑的。每一个宿主细胞都像一个微观的小工厂，按照细胞固有的程序完成“你给它们安排

更快克隆出重组表达质粒

下一步的研究了。对科研工作者而言，做实验就像是挖矿，你觉得那里面应该有非常有价值的东西就去挖了。刚开始你手工挖，觉得也太辛苦了，这时候Invitrogen跑出来，给你一把铲子，让你更有效率的去挖你的宝藏。无论你是否挖出金山、银山，反正Invitrogen靠着这把铲子发家了。 好了，罗嗦了这么久，你一定很想了解一下Invitrogen的这把铲子了吧，让我们言归正传。 Invitrogen公司总共有四个原核表达系统它们分别是：Champion™ pET