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文献和实验Using the DHFR Heat-Inducible Degron for Protein Inactivation in Schizosaccharomyces pombe
Inactivating a specific protein in vivo can yield important information about its function. One strategy previously developed inSaccharomyces cerevisiae by the Varshavsky group involves fusing a degron, derived from mouse dihydrofolate
细胞系等，该细胞有一定自发转化倾向，一般在转染前一天接种细胞，接种密度为2×104 /cm2 ,用含10%胎牛血清的DMEM液，37℃、5%CO2 培养，待细胞占50～70%瓶底面积时，用于转染试验。 (3)DNA-磷酸钙沉淀物的制备 ①将供体细胞DNA和PSV2-neo质粒载体DNA用TE配制成40mg/L的DNA溶液，同时向供体细胞DNA液200μl中加入带基因neo质粒DNA液(20mg/L)220μl和2×HBS 250μl(PSV2-neo为1～2mg/L的使用量)。 ②取500μl上述
Cytogenetic Characterization of Recombinant Cells
; therefore a selectable system is desirable to discriminate cells that have integrated the foreign DNA. Chinese hamster ovary (CHO) cells are most commonly used because of the availability of both a dihydrofolate reductase (DHFR)-deficient mutant cell line (CHO-DUKX
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