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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃;-20℃;室温
- 规格:
100T
产品概述:高纯质粒小量制备试剂盒(Plasmid Mini Preparation Kit)是一种用于从大肠杆菌中进行小量质粒的快速抽提的试剂盒。本试剂盒采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低PH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过去蛋白液和漂洗液将杂质和其他细菌成分去除,最后低盐、高PH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。本试剂盒快速,方便,无需使用有毒的苯酚、氯仿等试剂,也无需酒精沉淀,获得的质粒产量高,纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
注意事项:
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文献和实验/RealTime PCR扩增的技术进步,很多样品的需求量大大减少,几百个纳克到几个微克足够,而最常见的离心柱型小量提取,正好可以提取几个微克到十几微克的样品。完全可以满足下游试验的需要。 2. 离心柱操作不使用苯酚,氯仿有毒害物质。方便快捷,裂解后配合蛋白酶K消化,过柱子,漂洗,洗脱,几个简单步骤就可以完成全部过程。适合于标准化高通量操作,对操作技巧要求低,即使初学者提取也可以得到稳定的结果。 3. 联合的蛋白酶K消化,和漂洗,可以确保了高纯度的可能性。是目前所有方法中,纯度最高的一种全血
加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α(+)载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α(+)载体骨架连接基因片段1小时,载体末端和插入末端的比例为1:3(fmol)。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21(DE3)在冰上混合10分钟,并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
-PCR Kit(高效一步RT-PCR试剂盒) 15、DNA Blunting Kit(DNA平端化-连接试剂盒) 16、Nova T4 DNA Ligase 17、Nova Rapid Ligating Kit(Nova快速DNA连接试剂盒) 18、One-Step Competent Cell Prep Kit(一步法感受态细胞快速制备试剂盒) 19、Random Primer Labeling Kit(随即引物标记试剂盒) 20、T7 RNA Polymerase 21
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