- ￥50
- 万类生物
- 中国
- WLA094a
- 2025年12月21日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
4℃
- 规格：
100ml
产品名称：胰酶细胞消化液（含酚红）
产品概述：胰酶细胞消化液（含酚红）（Trypsin-EDTA Solution with phenol red）含0.25%胰酶、0.02%EDTA和酚红。该消化液经过过滤除菌，可以直接用于培养细胞的消化，或者一些组织的消化。
包装信息：
操作流程：
1. 贴壁细胞的消化：
a. 吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次。
b. 加入适量胰酶细胞消化液（含酚红），室温放置30s至2min。
c. 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化；或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。此时吸除胰酶细胞消化液（含酚红） 。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。
d. 如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液（含酚红）重新消化。
e. 如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液（含酚红）把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1min，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液（含酚红）后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。
2. 组织的消化：
不同的组织需要消化的时间相差很大，通常以消化后可以充分打散组织为宜。
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文献和实验动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液的配制方法
。再放入4℃预冷的适量D-Hanks液中，4℃下磁力搅拌使完全溶解。 3.用NaHC03干粉将胰酶溶液的pH值调至8.0左右(胰酶作用的最适pH值)，并加入0.02%EDTA以协助消化作用。 4.滤过除菌(方法见二、培养基的配制)，-20℃冻存。 注意事项： 1.BSS的pH值应确定为7.2左右。 2.如配制的Hanks液高压灭菌后液体变混，则可将100 mL的CaCl2与含有其他成分的液体分别装瓶高压灭菌之后，再在无菌条件下配制，定容
细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。4、此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。如果发现细胞消化时间过长，未及吹打细胞，细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落，直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。1000-2000g离心1分钟，沉淀细胞，尽量去除胰酶细胞消化液后，加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞，即可用于后续实验。常用的细胞消化液为胰蛋白酶（Trypsin），EDTA等，其功能主要是使细胞间的蛋白质（如细胞
材料1、实验动物孕13d的昆明种二级小鼠。2、主要试剂主要试剂 来源DMEM/F12 GIBCOrh-EGF peprotechrh-bFGF peprotechB-27 supplement GIBCOHEPES SigmaTrypsin SigmaPloy-L-lysine Sigma胎牛血清（FBS） 杭州四季青公司青霉素 华美链霉素 华美胰酶阻断剂（STI） GIBCO葡萄糖 药剂科制剂室台盼蓝 西安化学试剂厂蔗糖 西安化学试剂厂酚红 西安化学试剂厂KH
