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- 上海
- Western Blot技术服务
- 2025年07月16日
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- 服务名称：
WB
- 提供商：
上海笃玛生物科技有限公司
- 规格：
100
为了更好的完成自己的实验课题，您是不是为每天去别的实验室借仪器借耗材觉得烦恼，每天这个实验室那个实验室来回奔波觉得浪费不少时间，笃玛生物为您解决这个烦恼，承包实验WB、免疫组化,TUNEL,HE染色…
免疫印迹法 (Western blotting)
●主要实验步骤如下：
1. 蛋白质抽提
2. 蛋白质定量
3. 变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳（SDS-PAGE）
4. 蛋白质转移到硝酸纤维膜或PVDF膜
5. 膜的封闭和抗体孵育
6. 结果检测
7. 提供实验报告
免疫印迹法 (Western blotting) 是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学分析技术相结合的杂交技术。免疫印迹法具有分析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与分布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。 免疫印迹法(immunoblotting test,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法 Southern blot 相类似，亦被称为Western-blot.
免疫印迹法 (Western blotting)
双方约定（甲方：委托实验方；乙方：被委托方即上海笃玛生物科技有限公司）
甲方责任和义务
甲方为乙方提供实验的背景资料（包括样本描述、目的蛋白相关资料及必要的相关实验设计内容）、原始材料和必要的抗体及实验必须的实验数据,务必准确可靠；
甲方于合同签订3个工作日内一次性付清实验总费用的50%
甲方不得要求乙方根据自己的需要修改或编造实验结果；
乙方责任和义务
1. 乙方接受甲方的委托实验,为甲方提供全面周到的实验技术服务，并对甲方的实验设计、实验内容和实验结果保密；
2. 乙方在实验材料和实验经费的70%到位的工作日后15个工作日之内提交准确可靠的原始的实验结果；
3. 乙方为甲方提供原始实验结果和实验过程，实验结果以胶片的形式提供给甲方；
其它未尽事宜由双方协商解决。
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文献和实验检测的高通量能力结合起来，帮助科学家们一次实验就可以观测到细胞中各种蛋白之间的网络系统，节省了每次反复实验的人力和物力。领导这一研究的芝加哥大学癌症生物研究所资深研究员Richard B. Jones表示，“蛋白才是细胞中真正的行使功能的‘仪器’，但是由于这一系统太复杂，所以还没有科学家能深度剖析它们，现在我们终于能利用这一技术分析蛋白了。”自上个世纪70年代以来，实验室就开始利用Western blot方法来检测蛋白，这种方法又称为免疫印迹，是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测，对已知表达
样本准备 蛋白提取 所需仪器：匀浆器、RIPA 裂解液、PMSF（蛋白酶抑制剂）、磷酸酶抑制剂、剪刀、镊子，消毒酒精棉、PBS、移液器、离心机。 裂解液配制——RIPA 裂解液：PMSF=100：1。 1） 组织处理：首先用酒精棉消毒剪刀和镊子，取适量的组织于匀浆器中，用剪刀剪碎加适量的裂解液冰水中匀浆 1-4 min。匀浆结束后吸取溶液于 EP 管中保存备用。（含血液较多的组织可先用 PBS 清洗后再匀浆） 2） 细胞处理： A、 贴壁细胞处理：去掉培养基用 PBS 清洗后加入适量的裂解
llh刘丽华 各位好：我做了1个多月western blot了，内参跑得还可以，但是目的蛋白总是跑不好，今天跑出来非特异性条带很清楚，而目的条带却很淡，不知是什么原因！前一次也是这种情况，我就延长封闭时间至2h，一抗1:700，二抗1:5000，请各位高手帮忙分析一下吧！下面是我的图片，最下面，模糊的一条（靠图片中间的一条）是我的目的条带！ coffeeshine 如果非特异带很清楚，延长封闭时间没作用
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