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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Fluo 4-AM Special Packaging
- 库存:
8
- 供应商:
研卉生物
- 规格:
50ug
Fluo 4-AM Special Packaging
1-[2-Amino-5-(2,7-difluoro-6-acetoxymethoxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid, tetra(acetoxymethyl)ester
Fluo 4-AM 特殊包装
Fluo 4是一种将Fluo 3结构中的Cl替换成F的钙荧光探针。由于将Cl替换成了电子吸引力更强的F,它的最大激发波长会向短波长处偏离10 nm左右。这个波长更接近于氩激光器的波长,所以用氩激光器激发时,Fluo 4的荧光强度比Fluo 3强1倍。
由于Fluo 4与钙离子的亲和力和Fluo 3近似(Fluo 3:Kd=0.4 μmol/l、Fluo 4: Kd=0.36 μmol/l),所以使用上和Fluo 3也基本相同,可以使用激光共聚焦显微镜或流式细胞仪等仪器检测细胞内钙离子浓度的变化。
Fluo 4-AM是Fluo 4的一种乙酰甲酯衍生物,通过培养,能够轻易进入细胞中。AM进入细胞后会被胞内酯酶所水解,产生的Fluo 4随后会和钙离子(Ca2+)结合并发出荧光。钙离子探针、胞内荧光探针的种类繁多,根据不同的实验要求,实验者的选择性有很多。
Fluo 4-AM (钙离子荧光探针) 需用无水DMSO (anhydrous DMSO)配制。Fluo 4-AM是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。Fluo 4-AM进入细胞后可以被细胞内的酯酶剪切形成Fluo 4,从而被滞留在细胞内。
用二甲基亚砜(DMSO)将Fluo 4-AM配制为1~5 mM的原液, -20℃避光密封保存。使用前根据您实验的需要稀释成合适的浓度。
| 试剂名称 | 分子量 | 规格 | 浓度 | 配制量 |
| Fluo 4-AM | 1096.94 | 1 mg | 1 mM | 912 μl |
| 50 μg | 1 mM | 45.6 μl |
例如:需要配制1 mM的原液,用45.6 μl的无水DMSO溶解50 μg的Fluo 4-AM就可以 。
注意事项:
1. 保存方法:1)保存产品时需要密封和保持干燥-20℃保存。
2)如果将产品配置好后,也需要密封干燥-20℃保存。
2. 溶解液DMSO:使用新鲜、未开封过的无水DMSO
(开封过的无水DMSO如果吸水,将会影响Fluo 4-AM的稳定性)。
3. 溶解后,尽可能在短时间内用完。长期保存水气容易渗入试剂中。
激发波长:495 nm
发射波长:518 nm
文献参考
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文献和实验作用。在哺乳动物的神经系统中,钙离子是一类重要的神经元胞内信号分子,神经元静息状态下,胞内钙离子浓度约为50-100nM,而当神经元活动的时候,胞内钙离子浓度能上升10-100倍,而钙离子对于突触囊泡释放必不可少;神经元在放电的时候会爆发出一个短暂的钙离子浓度高峰,这意味着神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动。神经元钙离子浓度表征突触传递和神经元活动示意图因而,神经元钙离子成像技术的原理就是借助钙离子浓度与神经元活动之间的严格对应关系,利用特殊的荧光染料或者蛋白质荧光探针(钙离子指示
Fluo-3-Am为一新型的高度特异性Ca2+荧光指示剂,可以灵敏地反映细胞内游离钙离子浓度的变化,Fluo-3-Am进入细胞后经非特异性酯酶脱去Am酯,成为脂溶的Fluo-3留在细胞内,当Fluo-3与细胞内游离钙结合后,其荧光强度是Fluo-3本身的40倍以上,当用480nm波长激发时,其荧光强度与游离钙离子浓度成正比。具体如下:1、钙荧光探针负载;取细胞悬液,加Fluo-3-Am至10μmol/L,置二氧化碳培养箱中孵育1h,其间轻微振荡3次。离心,去掉多余的染料。再用无钙缓冲液反复洗涤
内酯酶水解后并与胞内游离钙结合后发出荧光。Kd值为Ca2+解离常数,表明检测Ca2+浓度的范围:0.1xKd-10xkd, Kd和很多因素有关,如pH、 Mg2+、与蛋白的结合、温度等。细胞内生理Ca2+浓度值(10-100n M),细胞内Ca2+超载浓度值(基础Ca2+浓度的10倍左右) 荧光探针 激发波长 发射波长 Kd FLuo3-AM, K+, dextran 506nm 525nm 390nM Fluo4 506nm 525nm
技术资料暂无技术资料 索取技术资料





